DNA의 당-인산 골격은 ( )의 매우 단단한 ( )으로 연결되어 있는 반면 상보적인 두 가닥은 약한 ( )에 의해 서로 연결되어 있다.

DNA 용액의 온도를 높이거나 또는 pH를 높이면 DNA의 두 사슬 간의 ( )이 파괴되어 두 사슬이 ( )될 수 있으며, 그 결과 DNA는 ( )으로 된다. 이러한 상태로 전이하는 것을 DNA의 ( )이라 한다.

고온, 높은 pH나 변성제에 의해 변성된 DNA는 적당한 조건 아래에서 원래의 상태로 회복될 수 있는데, 이러한 회복을 ( )이라고 한다.

실제 DNA 용액에서 ( ) DNA 용액의 A260값이 1이라면 동일한 농도의 ( )DNA 용액의 그것은 이보다 높은 1.4정도가 된다.

50%의 변성이 일어났을 때의 온도를 ( )라고 하면 Tm으로 표시한다.

GC의 함량이 많을수록 Tm이 증가함을 알 수 있는데, 그 이유는 ( )의 ( )에 비해 GC염기쌍사이에는 ( )으로 연결되어 있기 때문이다. NaOH용액과 같은 높은 ( ) 또한 매우 효율적으로 ( )를 변성시킬 수 있다. pH가 높은 상태에서는 ( )에 참여하는 많은 작용기들의 전하량을 변화시키게 되어 염기쌍들 간의 ( )을 방해하게 된다.

다른 유래의 단일가닥 DNA가 상보적으로 결합하여 이중가닥 DNA를 형성하는 것을 ( )라고 부르며, 이 결합체를 ( )라고 한다

DNA의 모든 반응기는 사실 ( )에 위치하여 수소결합으로 고정되어 있으며, 그 주위를 ( )과 ( )이 둘러싸며 보호하는 형태를 가지고 있다.

RNA의 당은 ( )로 2번과 3번 탄소에 모두 ( )가 연결되어 있다. 이러한 차이가 이 두분자의 안정성에 매우 큰 영향을 미치게 된다.

RNA의 경우에는 바로 옆의 ( )에 붙어 있는 ( )가 물리적인 근접성으로 인해 ( ) 조건하에서 RNA의 ( )축을 끊고 새로이 ( )와 결합하려고 ( )을 공격하게 되어 이 축이 절단될 위험성이 매우 증대된다. DNA느 이러한 ( )에 연결된 ( )의 부재로 인해 당-인산 골격이 절단된위험성이 줄어들게 된다.

세포나 조직에서 RNA를 분리할 때 가장 어려운 부분은 RNA의 구조적인 불안정성 외에도 ( )에 의한 ( )의 분해이다. RNA추출 용액에 0.1%( )를 처리하면 ( )내의 ( ), ( ), ( ), ( )을 변형시켜 효소의 작용을 억제시킴으로써 RNA 분해를 막게 된다.

박테리아로부터 플라스미드 DNA의 분리는 많은 유전공학 방법에서 가장 필수적인 단계 중 하나이다. 지금까지 많은 플라스미드 DNA분리 방법이 개발되어 사용되고 있는데, 한 번에 약 20~30ug정도의 플라스미드를 분리하는 방법인 ( )이 주로 사용된다.

플라스미드 DNA 분리방법 1) ( )도 포함하는( )를 얻는 과정 2) ( )만 ( )하는 과정 3) 분리된 플라스미드 DNA를 ( )시켜 순수한 플라스미드 DNA용액으로 만드는 과정

플라스미드 DNA분리 방법은 기본적으로 ( )와 ( ) 방법이 있다.

알칼리 용해방법 1) ( )를 파괴하는 ( ) 단계 2) ( )을 제거하고 ( )를 ( )시키는 단계 3) ( ) 단계 4) ( ) 단계

단단한세포벽을 물리적인방법으로 분해하는 과정에서 ( )가 쉽게 잘려진다.

DNA를 분리하는 기본 과정 1) ( ) 2) ( ) 3) ( )에서의 ( )과 ( ) 등의 단계로 이루어짐

식물세포가 가지는 세포벽 분쇄를 위해 대부분의 식물 유전체 DNA 분리 방법에서는 거의 예외 없이 ( )를 이용하여 ( )에서 단단한 식물 조직을 ( )하는 단계를 거침

양전하를 띤 CTAB은 수용액 상에서 음전하를 띤 DNA와 ( )의 염 조건에서 ( )의 복합체를 형성하는데, 이 조건에서는 대부분의 ( )이나 ( )은 용해되어 ( ) 상에서 존재하므로 원심분리에 의해 DNA/CTAB만을 가라앉혀 분리시킬 수 있다.

정리

정리

분리된파지 입자로부터 DNA를 분리하기 위해 SDS와 단백질 가수분해효소 K로 먼저 단백질 껍질을 제거한 다음 ( ) 주로 사용한다.

전체 RNA의 분리방법은 ( )과 ( )을 ( )의 온도로 사용함으로써 Hot-phenol추출법이라고 한다.

정리

핵산의 ( )과 ( )는 그들이 가지는 ( )로 인해 자외선을 흡수하는 성질을 가진다. ( )에서 이러한 흡수성은 260nm에서 최댓값을 보인다. 따라서 DNA와 RNA 등 ( )의 농도 측정을 위해서는 ( )를 이용하여 260nm에서 ( )를 측정하며 그 농도는 표와 같다.

핵산의 순도를 측정하기 위해서 보통 260nm에서 흡광도뿐만 아니라 280nm에서의 흡솽도를 동시에 측정하여 OD( )/( )의 비율을 계산한다.

순수하게 분리된 핵산은 OD A260/A280 값은 ( )~( )을 가지며, OD A260/A230값은 ( ) 이상의 값을 가진다. 즉, ODA260/A230의 값이 1.8이하라면 분리된 핵산 추출과정에서 사용한 시약 중 ( ), ( ), ( ), ( )과 기타 유기 용매에 의해 오염되었음을 말해준다.

정리

유전자 클로닝이나 재조합, DNA의 생화학적 연구, 유전자의 구조 연구나 유전자의 발현 조절 연구의 기본이 되는 유전자 조작 기술에는 ( ), ( )이나( ) 또는 특별한 작용기의 첨가와 제저가 매우 중요하다.

DNA의 조작 기술에는 고도로 정제된 여러 효소를 이용하게 되며 , 가장 기본이 되는 유전자의 절단과 연결에는 ( )와 ( )가 필수적이다.

( )는 핵산 분자를 절단하거나 또는 짧게 만드는 효소

핵산분해효소는 ( )를 절단하거나 또는 ( ) 만드는 효소

핵산분해효소는 핵산의 골격을 형성하는 ( )을 절단함으로써 핵산을 분해한다.

핵산분해효소는 작용 방법에 따라 크게 ( )와 ( )로 구분되며, 작용하는 대상에 따라 ( )와 ( )로 구분한다.

( )는 단일가닥의 DNA나 RNA를 분해하는 효소

핵산분해효소는 효소의 분류는 ( )이 있고, 여기에는 효소의 종류는 ( ) 등이 있다.

중합효소는 효소의 분류는 ( )와 ( )가 있다. 중합효소는 DNA 중합효소에 효소의 종류에는 ( )가 있다.

라이게이즈 에 효소의 종류는 ( )가 있다.

단백질분해효소는 효소의 종류에는 ( )

RNA분해효소는 ( ), ( ), ( )의 종류가 있다.

( )는 단일가닥 RNA를 절단하는 효소이다.

RNase A는 DNA또는 RNA에서 ( )가 변화된 점 ( )를 감지하는 데 이용된다.

( )은 구아닌 염기의 3'인산기를 공격하여 인접한 염기와의 5'인산 결합을 절단한느 효소로서, DNA-RNA혼성체나 RNA-RNA혼성체에서 혼성화되지 못한 단일가닥 RNA를 제거한다.

RNase T1은 ( )의 ( )를 공격하여 인접한 염기와의 ( )을 절단하는 효소로서, DNA-RNA 혼성체나 RNA-RNA혼성체에서 혼성화되지 못한 ( )를 제거한다.

박테리아가 침입해온 박테리오파지의 번식을 제한하는 작용을 ( )이라고 한다.

박테리아 내부에 침투한 바이러스 DNA를 분해할 수 있느 ( )

박테리아에서 침입한 바이러스의 DNA는 제한작용으로 파괴되지만 자신의 DNA는 ( )로부터 보호된다. 그 이유는 박테리아 자신의 DNA에 ( )가 붙게 하여 ( )자신의 효소가 바이러스 DNA만을 인식해서 분해하는 반면 자신의 DNA는 효소가 절단하지 못하도록 하기 때문이다.

( )는 특정 염기서열에서 DNA분자의 당-인산 골격을 끊는 기능을 가지는 효소이다.

제한효소는 특정 염기서열에서 DNA분자의 ( )을 끊는 기능을 가지는 효소이다.

제한효소는 DNA분자 내부의 ( )을 절단하는 ( )의 일종이다. 제한효소의 DNA 인식 및 절단 부위는 ( )를 가진다.

회문구조란 각 DNA가닥의 서열을 같은 방향으로 읽었을 때 ( )을 가지는 구조를 말한다.

제한효소에 의해 절단된DNA 부위 1) ( )에는 5'말단이 돌출되는 경우와 3' 말단이 돌출되는 경우가 존재 2)또 다른 경우는, Smal 절단 부위처럼 ( )을 갖는 경우이다.

제한효소에 의해 절단된 DNA부위 1) 점착성 말단을 갖는 경우이다. 점착성 말단에는 ( )이 ( )되는 경우와 ( )이 돌출되는 경우가 존재한다. 2) 또 다른 경우는 ( )처럼 비점착성 말달을 갖는 경우

제한효소는 DNA절단방식에 따라 1형, 2형, 3형 세 가지 형으로 나눈다. 1형은 ( )과 ( )가 다른데, 보통 절단 부위는 ( )로부터 약 1,000bp정도 떨어진 곳에서 존재하며, 절단된 염기서열도 인정하지 않다. 3형 역시 ( )와 ( )가 서로 다르며, 1형과 마찬가지로 5~7bp길이의 ( )을 인식한다. 2형 제한효소는 dna상의 특정한 ( )에서 DNA를 절단하므로 유전자 조작에 아주 중요하게 사용된다.

제한효소 이름은 그것이 분리된 ( ), ( ), ( )을 따서 짓는다.

( )는 서로 다른 박테리아 균주로부터 분리된 효소로서 완충액의 종류나 온도 등 반응 조건 등이 다른 수 있다.

Isoschizomer는 서로 다른 박테리아 균주로부터 분리된 효소로서 완충액의 ( )나 ( ) 등 반응 조건 등이 다를 수 있다. 또한, 동일한 인식 분위를 가지지만 절단 위치가 다른 효소를 ( )라고 부른다.

일부 제한효소는 서로 간에 인식 부위는 다르지만 상호 호환이 되어 ( )을 생성하기도 한다.

제한효소 절단 부위를 DNA 상에 표시할 수 있는데, 이렇게 DNA상의 여러 다른 제한효소 자린의 위치를 나타낸 지도를 ( )라고 한다.

ZNF의 구조와 작용 메커니즘 - cystein ,histidine은 아미노산들이 ( )과 결합하고 있으며 전체적으로 결합된모야이 손가락 모양이어서 ( )라는 이름을 붙였다.

징크핑거 한 모듈이 ( )를 인식하는데 이것이 양쪽에 ( )개씩 존재하면 왼쪽과 오른쪽 합쳐서 ( )개의 특이한 염기서열을 인식하는데 이 정도면 사람의 염색체에서 단 ( )만절단할 수 있는 정도이다.

유전체까지도 절단하고 붙일 수 있는 기능이 있어 ( )라고 통칭된다. 이런 유전자 가위를 이용하면 ( )까지도 가능한데 이것을 유전체에서 특정 염기서열을 인식한후 해당 부위의 DNA를 정교하게 잘라내는 시스템을 말한다.

2000년대 초반에 개발된1세대 유전자 편집 기술이 ( ) 2010년대에 개발된 2세대 기술인 ( )과 2012년에 개발된 3세대 유전자 편집 기술인 ( )가 있다.

( )는 제한효소처럼 특정 DNA서열을 인식하여 절단하지만, 분리된DNA를 절단하는 것보다 유전자를 생체 내에 도입하고 발현시켜서 가위처럼 작동하게 하는 방식을 주로 택한다.

유전자 가위는 ( )처럼 특정 ( )을 인식하여 절단하지만, 분리된 DNA를 절단하는 것보다 유전자를 생체 내에 도입하고 발현시켜서 ( )처럼 작동하게 하는 방식을 주로 택한다.

( )는 Fok1 제한효소 DNA 절단 도메인에 징크핑거 모듈을 이용하여 만들어지는 맞춤형 DNA인식 도메인을 결합한 것이다.

징크핑거 뉴클리에이즈는 ( )에 ( )을 이용하여 만들어지는 맞춤형 ( )을 결합한 것이다.

징크핑거 한모듈은 ( )개의 ( )를 인식하는데 이 숫자를 늘려나가면 아주 특이한염기서열을 인식할 수 있으므로 유전체에서 단 ( )만을 자르는 것도 가능하다.

징크핑거의 ( )과 ( )을 결합하여 개발된 ( )이다.

특정 서열을 인식하는 단백질은 식물의 병원균 세균인 ( )에서 발견한 ( )로 유래하였다.

TALE 단백질은 하나의 염기쌍을 인식하는 모듈이 여러 개 반복적으로 있는 구조이다. 이 모듈은 ( ) ( )~( )개로 구성되어 있으며 ( )와 ( )의 아미노산의 종류에 따라 결합하는 염기가 다르다.

3세대 유전자 편집기술인 크리스퍼 유전자 가위는 교정하려는 DNA와 상보적인 서열을 갖는 단일 가이드 RNA와 특정 염기서열을 자르는 가위 역할을 하는 ( )인 ( )로 구성된다.

( )는 표적 DNA와 상보적 서열 외에도 PAM과 상보적 서열을 포함해야 한다. 그리고 ( )은 sgRNA와 결합한 가닥뿐 아니라 이 가닥과 상보적 가닥 모두를 절단하므로 이중가닥 DNA를 자르게 된다.

sgRNA는 ( )와 ( ) 이외에도 ( )과 ( )을 포함해야 함

Cas9은 ( )와 결합한 가닥뿐 아니라 이 가닥과 ( ) 모두를 절단하므로 ( )를 자르게 된다.

( )는 ZFN과 TALEN보다 많은 장점이 있다.

크리스퍼 가위 장점 1) ( )개 붙일 수 있음 2) ( )하고 ( )이 적게 듦 3) ( )이 가능 4) ( )를 미리 예측할 수 있음

뉴클리에이즈는 ( ), 탈렌은 ( ), 크리스퍼는 ( )라고 함 뉴클리에이즈는 ( )라고함

크리스퍼 가위의 단점 1) ( ) 중 ( )이 있는 곳만 절단 가능 2) ( )으로 ( )할 확률이 어느 정도 있음. ( )를 절단하는 확률이 있다. 3) ( )를 자름 4) ( )

( )는 DNA나 RNA를 주형으로 하여 새로운 DNA가닥을 합성하는 효소

DNA중합효소는 ( )나( )를 주형으로 하여 새로운 ( )을 합성하는 효소

( )는 중합반응을 시작하기 위해 프라이머에 의해 이중가닥이 형성되어야만 작용한다.

중합효소는 중합반응을 시작하기 위해 ( )에 의해 이중가닥이 형성되어야만 작용한다.

중합효소 3가지 종류 - 첫번째, ( ) 및 ( )와 같이 DNA를 주형으로 하여 DNA가닥을 합성하는 중합효소 - 두번째 종류, RNA를 주형으로 DNA를 합성하는 ( )이며, - 마지막으로 주형 DNA를 복사하지 않고 DNA 분자의 말단에 하나 또는 그 이상의 뉴클레오타이드를 첨가하는 효소인 ( )도 중합효소의 한 종류이다.

중합반응과 핵산 분해반응을 동시에 수행할 수 있어 세포 내에서는 교정 역할을 수행한다. 실험상황에서 이효소는 ( )에 의한DNA 표지에 이용되는데, 이 효소는 작용하는 DNA 앞부분의 염기 일부를 제거시킨 다음 중합작용을 하는 특징이 있다.

DNA 중합효소 1이 가지고 있는 5'-> 3'핵산말단 분해 기능은 프라이머의 5'말단을 분해하기 때문에 종종 많은 분자생물학 실험수행에 불편을 초래한다. 따라서, 이러한 핵산 분해 능력을 DNA 중합효소1에서 제거한효소가 ( )이다.

PCR에 필수 효소인 ( )는 주로 ( )에서 분리되는 효소로서, ( )에서도 매우 안정한 ( )이다.

가장 처음 분리된열 안정성 중합효소는 호열성 세균인 ( )이다. 이들 열 안정성 효소가 보이는 중합반응의 최적 온도는 ( )~( )도 이고 열 안정성은 효소에 따라 다르나 보통 ( )도에서 짧게는 ( )분 정도, 길게는 ( )시간 이상까지 매우 안정적이다.

( )는 RNA를 주형으로 하여 DNA를 합성하는 효소인데, 결과로 합성된 DNA를 상보성 DNA, 즉, cDNA라고 하며 여러 종류의 레트로 바이러스의 복제에 필수적인효소이다.

역전사효소는 ( )를 주형으로 하여 ( )를 합성하는 효소인데, 결과로 합성된 DNA를 ( ), 즉, ( )라고 하며 여러 종류의 ( )의 복제에 필수적인 효소이다. 일반적으로 ( )나 ( ) 등 두 종류의 역전사 효소가 상업적으로 개발되어 주로 사용된다.

역전사효소는 ( )이나 ( ) 등의 분자생물학 핵심 기술에 필수적으로 사용됨

재조합 DNA 분자 구축의 마지막 단계는 ( )에 의해 절단된 서로 다른 ( )를 연결하는 과정이다. DNA절편을 연결할 수 있는 방법은 여러 가지 있으나 ( )라고 불리는 DNA 연결효소에 의한 방법이 많이 사용된다.

라이게이즈는 ( )에서 생긴 틈을 메워주기 위한 효소, 즉 ( )로 절단된 두 ( )을 이어주는 작용을 하는 ( )이다.

DNA라이게이즈가 DNA를 붙이는 분자적 작용과정은 어떻게 될까? 1) 점착성 말단의 경우 먼저 ( )에 의해 ( )가 ( )을 이루면 ( )가 그 틈을 메워주는 방식으로 두 DNA절편을 연결 2) 비점착성 발단의 경우, ( )을 연결하여 준다. 즉, 라이게이즈는 DNA분자 내의 ( )이나 제한효소로 절단된 부위의 ( )과 ( )사이에 ( )을 형성함으로써 ( )를 연결한다.

DNA와 같이 전하를 띤 고분자 물질을 전기장을 띤 매질에서 이동 분리시켜 이들의 순도나 성질의 분석 및 분리 등에 사용하는 방법

전기영동 - DNA는 구성성분인 ( )로 말미암아 DNA분자는 수용액에서 ( )를 띠므로 망상 구조의 반 고형상 지지판 위에 앉히고 전장을 걸어주면 DNA분자는 고체 지지체 내에서 ( ) 쪽으로 이동한다. 이때 사용하는 젤의 재료에 따라 전기영동은 크게 ( )와 ( )로 나누어진다.

아가로오스 젤 전기영동은 ( )와 ( ) 등 ( )을 분리하는 전기영동이 젤 재료로 매우 유용하게 쓰인다. - ( ),( ),( )을 30% 글리세롤 용액에 녹여준다.

아가로오스 젤에서 DNA의 염색과 보기 - 젤 상에서 DNA분자는 ( )에 의해염색되어 관찰될 수 있는데, 이는 EtBr이 DNA의 이중나선구조에 끼어들어 ( )를 비추면 형광을 나타내기 때문이다. - 전기영동시 젤 상에서 움직인 DNA를 정확한크기를 알기 위해 이미 크기를 알고 있는 ( )와 같이 전기영동을 한다. - 최근에는 돌연변이 유발원이 EtBr대신 ( )를 사용하고 있다. 이것은 ( )을 착색시키는데 사용되는 ( )염색약이다.