제3장. 핵산의 성질과 분리/ 제4장. 효소와 전기영동

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DNA의 당-인산 골격은 ( )의 매우 단단한 ( )으로 연결되어 있는 반면 상보적인 두 가닥은 약한 ( )에 의해 서로 연결되어 있다.

인산다이에스터 결합, 공유결합, 수소 결합

DNA 용액의 온도를 높이거나 또는 pH를 높이면 DNA의 두 사슬 간의 ( )이 파괴되어 두 사슬이 ( )될 수 있으며, 그 결과 DNA는 ( )으로 된다. 이러한 상태로 전이하는 것을 DNA의 ( )이라 한다.

수소결합, 분리, 단일가닥, 변성

고온, 높은 pH나 변성제에 의해 변성된 DNA는 적당한 조건 아래에서 원래의 상태로 회복될 수 있는데, 이러한 회복을 ( )이라고 한다.

재생

실제 DNA 용액에서 ( ) DNA 용액의 A260값이 1이라면 동일한 농도의 ( )DNA 용액의 그것은 이보다 높은 1.4정도가 된다.

이중가닥, 단일가닥

50%의 변성이 일어났을 때의 온도를 ( )라고 하면 Tm으로 표시한다.

변성온도

GC의 함량이 많을수록 Tm이 증가함을 알 수 있는데, 그 이유는 ( )의 ( )에 비해 GC염기쌍사이에는 ( )으로 연결되어 있기 때문이다. NaOH용액과 같은 높은 ( ) 또한 매우 효율적으로 ( )를 변성시킬 수 있다. pH가 높은 상태에서는 ( )에 참여하는 많은 작용기들의 전하량을 변화시키게 되어 염기쌍들 간의 ( )을 방해하게 된다.

AT염기쌍, 결합, 3중 수소 결합, pH, DNA, 수소 결합, 수소 결합

다른 유래의 단일가닥 DNA가 상보적으로 결합하여 이중가닥 DNA를 형성하는 것을 ( )라고 부르며, 이 결합체를 ( )라고 한다

혼성화, 혼성 이중체

DNA의 모든 반응기는 사실 ( )에 위치하여 수소결합으로 고정되어 있으며, 그 주위를 ( )과 ( )이 둘러싸며 보호하는 형태를 가지고 있다.

나선 구조 중앙, 인산, 당

RNA의 당은 ( )로 2번과 3번 탄소에 모두 ( )가 연결되어 있다. 이러한 차이가 이 두분자의 안정성에 매우 큰 영향을 미치게 된다.

리보오스, OH기

RNA의 경우에는 바로 옆의 ( )에 붙어 있는 ( )가 물리적인 근접성으로 인해 ( ) 조건하에서 RNA의 ( )축을 끊고 새로이 ( )와 결합하려고 ( )을 공격하게 되어 이 축이 절단될 위험성이 매우 증대된다. DNA느 이러한 ( )에 연결된 ( )의 부재로 인해 당-인산 골격이 절단된위험성이 줄어들게 된다.

2번 탄소, OH기, 알칼리, 당-인산 골격, 인산기, 당-인산 골격, 2번 탄소, OH기

세포나 조직에서 RNA를 분리할 때 가장 어려운 부분은 RNA의 구조적인 불안정성 외에도 ( )에 의한 ( )의 분해이다. RNA추출 용액에 0.1%( )를 처리하면 ( )내의 ( ), ( ), ( ), ( )을 변형시켜 효소의 작용을 억제시킴으로써 RNA 분해를 막게 된다.

RNase, RNA, DEPC, 히스티딘, 라이신, 시스테인, 타이로신

박테리아로부터 플라스미드 DNA의 분리는 많은 유전공학 방법에서 가장 필수적인 단계 중 하나이다. 지금까지 많은 플라스미드 DNA분리 방법이 개발되어 사용되고 있는데, 한 번에 약 20~30ug정도의 플라스미드를 분리하는 방법인 ( )이 주로 사용된다.

플라스미드 소량 분리법

플라스미드 DNA 분리방법 1) ( )도 포함하는( )를 얻는 과정 2) ( )만 ( )하는 과정 3) 분리된 플라스미드 DNA를 ( )시켜 순수한 플라스미드 DNA용액으로 만드는 과정

유전체 DNA, 세포 용해액, 플라스미드 DNA, 분리, 농축

플라스미드 DNA분리 방법은 기본적으로 ( )와 ( ) 방법이 있다.

알칼리 용해, 끓이기

알칼리 용해방법 1) ( )를 파괴하는 ( ) 단계 2) ( )을 제거하고 ( )를 ( )시키는 단계 3) ( ) 단계 4) ( ) 단계

세포, 용해, 단백질, 박테리아 DNA, 변성, 중화, DNA 회수

단단한세포벽을 물리적인방법으로 분해하는 과정에서 ( )가 쉽게 잘려진다.

거대 유전자 DNA 분자

DNA를 분리하는 기본 과정 1) ( ) 2) ( ) 3) ( )에서의 ( )과 ( ) 등의 단계로 이루어짐

식물 분쇄, 세포용해, 용해된 세포, DNA 추출, 농축

식물세포가 가지는 세포벽 분쇄를 위해 대부분의 식물 유전체 DNA 분리 방법에서는 거의 예외 없이 ( )를 이용하여 ( )에서 단단한 식물 조직을 ( )하는 단계를 거침

액체 질소, 막자사발, 분쇄

양전하를 띤 CTAB은 수용액 상에서 음전하를 띤 DNA와 ( )의 염 조건에서 ( )의 복합체를 형성하는데, 이 조건에서는 대부분의 ( )이나 ( )은 용해되어 ( ) 상에서 존재하므로 원심분리에 의해 DNA/CTAB만을 가라앉혀 분리시킬 수 있다.

0.5M, 불용성, 탄수화물, 단백질, 수용액

정리

분리된파지 입자로부터 DNA를 분리하기 위해 SDS와 단백질 가수분해효소 K로 먼저 단백질 껍질을 제거한 다음 ( ) 주로 사용한다.

페놀-클로로포름 추출법

전체 RNA의 분리방법은 ( )과 ( )을 ( )의 온도로 사용함으로써 Hot-phenol추출법이라고 한다.

추출 용액, 페놀, 65도

정리

핵산의 ( )과 ( )는 그들이 가지는 ( )로 인해 자외선을 흡수하는 성질을 가진다. ( )에서 이러한 흡수성은 260nm에서 최댓값을 보인다. 따라서 DNA와 RNA 등 ( )의 농도 측정을 위해서는 ( )를 이용하여 260nm에서 ( )를 측정하며 그 농도는 표와 같다.

퓨린, 피리미딘 염기, 방향족 구조, pH7, 핵산 수용액, 분광광도계, 흡수도

핵산의 순도를 측정하기 위해서 보통 260nm에서 흡광도뿐만 아니라 280nm에서의 흡솽도를 동시에 측정하여 OD( )/( )의 비율을 계산한다.

A260, A280

순수하게 분리된 핵산은 OD A260/A280 값은 ( )~( )을 가지며, OD A260/A230값은 ( ) 이상의 값을 가진다. 즉, ODA260/A230의 값이 1.8이하라면 분리된 핵산 추출과정에서 사용한 시약 중 ( ), ( ), ( ), ( )과 기타 유기 용매에 의해 오염되었음을 말해준다.

1.8, 2.0, 1.8, 페놀, thiocyanate, guanidine, 에탄올

정리

유전자 클로닝이나 재조합, DNA의 생화학적 연구, 유전자의 구조 연구나 유전자의 발현 조절 연구의 기본이 되는 유전자 조작 기술에는 ( ), ( )이나( ) 또는 특별한 작용기의 첨가와 제저가 매우 중요하다.

DNA의 절단과 연결, DNA증폭, RNA합성

DNA의 조작 기술에는 고도로 정제된 여러 효소를 이용하게 되며 , 가장 기본이 되는 유전자의 절단과 연결에는 ( )와 ( )가 필수적이다.

제한효소, 라이게이즈

( )는 핵산 분자를 절단하거나 또는 짧게 만드는 효소

핵산분해효소

핵산분해효소는 ( )를 절단하거나 또는 ( ) 만드는 효소

핵산 분자, 짧게

핵산분해효소는 핵산의 골격을 형성하는 ( )을 절단함으로써 핵산을 분해한다.

인산다이에스터 결합

핵산분해효소는 작용 방법에 따라 크게 ( )와 ( )로 구분되며, 작용하는 대상에 따라 ( )와 ( )로 구분한다.

핵산말단분해효소, 핵산내부분해효소, DNA 분해효소, RNA 분해효소

( )는 단일가닥의 DNA나 RNA를 분해하는 효소

S1뉴클리에이즈

핵산분해효소는 효소의 분류는 ( )이 있고, 여기에는 효소의 종류는 ( ) 등이 있다.

DNA 내부분해효소, 제한효소

중합효소는 효소의 분류는 ( )와 ( )가 있다. 중합효소는 DNA 중합효소에 효소의 종류에는 ( )가 있다.

DNA 중합효소, 역전사효소, Taq polymerase

라이게이즈 에 효소의 종류는 ( )가 있다.

T4 DNA 라이게이즈

단백질분해효소는 효소의 종류에는 ( )

프로티네이즈K

RNA분해효소는 ( ), ( ), ( )의 종류가 있다.

RNase H, RNase A, RNase T1

( )는 단일가닥 RNA를 절단하는 효소이다.

RNase A

RNase A는 DNA또는 RNA에서 ( )가 변화된 점 ( )를 감지하는 데 이용된다.

단일염기, 점돌연변이

( )은 구아닌 염기의 3'인산기를 공격하여 인접한 염기와의 5'인산 결합을 절단한느 효소로서, DNA-RNA혼성체나 RNA-RNA혼성체에서 혼성화되지 못한 단일가닥 RNA를 제거한다.

RNase T1

RNase T1은 ( )의 ( )를 공격하여 인접한 염기와의 ( )을 절단하는 효소로서, DNA-RNA 혼성체나 RNA-RNA혼성체에서 혼성화되지 못한 ( )를 제거한다.

구아닌 염기, 3'인산기, 5' 인산결합, 단일가닥 RNA

박테리아가 침입해온 박테리오파지의 번식을 제한하는 작용을 ( )이라고 한다.

제한작용

박테리아 내부에 침투한 바이러스 DNA를 분해할 수 있느 ( )

제한효소

박테리아에서 침입한 바이러스의 DNA는 제한작용으로 파괴되지만 자신의 DNA는 ( )로부터 보호된다. 그 이유는 박테리아 자신의 DNA에 ( )가 붙게 하여 ( )자신의 효소가 바이러스 DNA만을 인식해서 분해하는 반면 자신의 DNA는 효소가 절단하지 못하도록 하기 때문이다.

효소, 메틸기, 메틸화

( )는 특정 염기서열에서 DNA분자의 당-인산 골격을 끊는 기능을 가지는 효소이다.

제한효소

제한효소는 특정 염기서열에서 DNA분자의 ( )을 끊는 기능을 가지는 효소이다.

당-인산 골격

제한효소는 DNA분자 내부의 ( )을 절단하는 ( )의 일종이다. 제한효소의 DNA 인식 및 절단 부위는 ( )를 가진다.

인산다이에스터 결합, 핵산내부분해효소, 회문 구조

회문구조란 각 DNA가닥의 서열을 같은 방향으로 읽었을 때 ( )을 가지는 구조를 말한다.

똑같은 염기서열

제한효소에 의해 절단된DNA 부위 1) ( )에는 5'말단이 돌출되는 경우와 3' 말단이 돌출되는 경우가 존재 2)또 다른 경우는, Smal 절단 부위처럼 ( )을 갖는 경우이다.

점착성 말단, 비점착성 말단

제한효소에 의해 절단된 DNA부위 1) 점착성 말단을 갖는 경우이다. 점착성 말단에는 ( )이 ( )되는 경우와 ( )이 돌출되는 경우가 존재한다. 2) 또 다른 경우는 ( )처럼 비점착성 말달을 갖는 경우

5'말단, 돌출, 3'말단, smal절단 부위

제한효소는 DNA절단방식에 따라 1형, 2형, 3형 세 가지 형으로 나눈다. 1형은 ( )과 ( )가 다른데, 보통 절단 부위는 ( )로부터 약 1,000bp정도 떨어진 곳에서 존재하며, 절단된 염기서열도 인정하지 않다. 3형 역시 ( )와 ( )가 서로 다르며, 1형과 마찬가지로 5~7bp길이의 ( )을 인식한다. 2형 제한효소는 dna상의 특정한 ( )에서 DNA를 절단하므로 유전자 조작에 아주 중요하게 사용된다.

인식 염기서열, 절단 부위, 절단 부위, 인식 부위, 절단 부위, 비대칭적 염기서열, 인식 염기서열

제한효소 이름은 그것이 분리된 ( ), ( ), ( )을 따서 짓는다.

미생물의 속명, 종명, 균주명

( )는 서로 다른 박테리아 균주로부터 분리된 효소로서 완충액의 종류나 온도 등 반응 조건 등이 다른 수 있다.

Isoschizomer

Isoschizomer는 서로 다른 박테리아 균주로부터 분리된 효소로서 완충액의 ( )나 ( ) 등 반응 조건 등이 다를 수 있다. 또한, 동일한 인식 분위를 가지지만 절단 위치가 다른 효소를 ( )라고 부른다.

종류, 온도, neoschizomer

일부 제한효소는 서로 간에 인식 부위는 다르지만 상호 호환이 되어 ( )을 생성하기도 한다.

점착성 말단

제한효소 절단 부위를 DNA 상에 표시할 수 있는데, 이렇게 DNA상의 여러 다른 제한효소 자린의 위치를 나타낸 지도를 ( )라고 한다.

제한효소 지도

ZNF의 구조와 작용 메커니즘 - cystein ,histidine은 아미노산들이 ( )과 결합하고 있으며 전체적으로 결합된모야이 손가락 모양이어서 ( )라는 이름을 붙였다.

아연, 징크핑거

징크핑거 한 모듈이 ( )를 인식하는데 이것이 양쪽에 ( )개씩 존재하면 왼쪽과 오른쪽 합쳐서 ( )개의 특이한 염기서열을 인식하는데 이 정도면 사람의 염색체에서 단 ( )만절단할 수 있는 정도이다.

3염기, 4, 24, 한군데

유전체까지도 절단하고 붙일 수 있는 기능이 있어 ( )라고 통칭된다. 이런 유전자 가위를 이용하면 ( )까지도 가능한데 이것을 유전체에서 특정 염기서열을 인식한후 해당 부위의 DNA를 정교하게 잘라내는 시스템을 말한다.

유전자 가위, 유전체 교정

2000년대 초반에 개발된1세대 유전자 편집 기술이 ( ) 2010년대에 개발된 2세대 기술인 ( )과 2012년에 개발된 3세대 유전자 편집 기술인 ( )가 있다.

징크핑거 뉴클리에이즈, 탈렌, 크리스퍼

( )는 제한효소처럼 특정 DNA서열을 인식하여 절단하지만, 분리된DNA를 절단하는 것보다 유전자를 생체 내에 도입하고 발현시켜서 가위처럼 작동하게 하는 방식을 주로 택한다.

유전자 가위

유전자 가위는 ( )처럼 특정 ( )을 인식하여 절단하지만, 분리된 DNA를 절단하는 것보다 유전자를 생체 내에 도입하고 발현시켜서 ( )처럼 작동하게 하는 방식을 주로 택한다.

제한효소, DNA서열, 가위

( )는 Fok1 제한효소 DNA 절단 도메인에 징크핑거 모듈을 이용하여 만들어지는 맞춤형 DNA인식 도메인을 결합한 것이다.

징크핑거 뉴클리에이즈

징크핑거 뉴클리에이즈는 ( )에 ( )을 이용하여 만들어지는 맞춤형 ( )을 결합한 것이다.

Fok1제한효소 DNA 절단 도메인, 징크핑거 모듈, DNA 인식 도메인

징크핑거 한모듈은 ( )개의 ( )를 인식하는데 이 숫자를 늘려나가면 아주 특이한염기서열을 인식할 수 있으므로 유전체에서 단 ( )만을 자르는 것도 가능하다.

3, 염기, 한군데

징크핑거의 ( )과 ( )을 결합하여 개발된 ( )이다.

DNA인식 능력, 제한효소의 DNA 절단 능력, 유전자 가위

특정 서열을 인식하는 단백질은 식물의 병원균 세균인 ( )에서 발견한 ( )로 유래하였다.

Xan-thomonas, transcription activator-like effector

TALE 단백질은 하나의 염기쌍을 인식하는 모듈이 여러 개 반복적으로 있는 구조이다. 이 모듈은 ( ) ( )~( )개로 구성되어 있으며 ( )와 ( )의 아미노산의 종류에 따라 결합하는 염기가 다르다.

아미노산, 33, 35, 12번째, 13번째

3세대 유전자 편집기술인 크리스퍼 유전자 가위는 교정하려는 DNA와 상보적인 서열을 갖는 단일 가이드 RNA와 특정 염기서열을 자르는 가위 역할을 하는 ( )인 ( )로 구성된다.

뉴클리에이즈, Cas9 단백질

( )는 표적 DNA와 상보적 서열 외에도 PAM과 상보적 서열을 포함해야 한다. 그리고 ( )은 sgRNA와 결합한 가닥뿐 아니라 이 가닥과 상보적 가닥 모두를 절단하므로 이중가닥 DNA를 자르게 된다.

sgRNA, Cas9

sgRNA는 ( )와 ( ) 이외에도 ( )과 ( )을 포함해야 함

표적DNA, 상보적 서열, PAM, 상보적 서열

Cas9은 ( )와 결합한 가닥뿐 아니라 이 가닥과 ( ) 모두를 절단하므로 ( )를 자르게 된다.

sgRNA, 상보적 가닥, 이중가닥 DNA

( )는 ZFN과 TALEN보다 많은 장점이 있다.

크리스퍼 가위

크리스퍼 가위 장점 1) ( )개 붙일 수 있음 2) ( )하고 ( )이 적게 듦 3) ( )이 가능 4) ( )를 미리 예측할 수 있음

21, 간단, 시간, 다중 절단, 절단 자리

뉴클리에이즈는 ( ), 탈렌은 ( ), 크리스퍼는 ( )라고 함 뉴클리에이즈는 ( )라고함

ZFN, TALENs, (CRISPR/Cas9), 징크핑거 뉴클리에이즈

크리스퍼 가위의 단점 1) ( ) 중 ( )이 있는 곳만 절단 가능 2) ( )으로 ( )할 확률이 어느 정도 있음. ( )를 절단하는 확률이 있다. 3) ( )를 자름 4) ( )

유전체 서열, PAM서열, 비특이적, 절단, 비표적(표적 이외의 위치), 21개, 만들기 어려움

( )는 DNA나 RNA를 주형으로 하여 새로운 DNA가닥을 합성하는 효소

DNA 중합효소

DNA중합효소는 ( )나( )를 주형으로 하여 새로운 ( )을 합성하는 효소

DNA, RNA, DNA가닥

( )는 중합반응을 시작하기 위해 프라이머에 의해 이중가닥이 형성되어야만 작용한다.

중합효소

중합효소는 중합반응을 시작하기 위해 ( )에 의해 이중가닥이 형성되어야만 작용한다.

프라이머

중합효소 3가지 종류 - 첫번째, ( ) 및 ( )와 같이 DNA를 주형으로 하여 DNA가닥을 합성하는 중합효소 - 두번째 종류, RNA를 주형으로 DNA를 합성하는 ( )이며, - 마지막으로 주형 DNA를 복사하지 않고 DNA 분자의 말단에 하나 또는 그 이상의 뉴클레오타이드를 첨가하는 효소인 ( )도 중합효소의 한 종류이다.

DNA 중합효소, Taq중합효소, 역전사효소, 말단 디옥시뉴클레오타이드 전달효소

중합반응과 핵산 분해반응을 동시에 수행할 수 있어 세포 내에서는 교정 역할을 수행한다. 실험상황에서 이효소는 ( )에 의한DNA 표지에 이용되는데, 이 효소는 작용하는 DNA 앞부분의 염기 일부를 제거시킨 다음 중합작용을 하는 특징이 있다.

틈새번역

DNA 중합효소 1이 가지고 있는 5'-> 3'핵산말단 분해 기능은 프라이머의 5'말단을 분해하기 때문에 종종 많은 분자생물학 실험수행에 불편을 초래한다. 따라서, 이러한 핵산 분해 능력을 DNA 중합효소1에서 제거한효소가 ( )이다.

클레나우 절편

PCR에 필수 효소인 ( )는 주로 ( )에서 분리되는 효소로서, ( )에서도 매우 안정한 ( )이다.

열 안정성 중합효소, 호열성 고세균, 고온, 중합효소

가장 처음 분리된열 안정성 중합효소는 호열성 세균인 ( )이다. 이들 열 안정성 효소가 보이는 중합반응의 최적 온도는 ( )~( )도 이고 열 안정성은 효소에 따라 다르나 보통 ( )도에서 짧게는 ( )분 정도, 길게는 ( )시간 이상까지 매우 안정적이다.

Taq중합효소, 75, 80, 95, 10, 4

( )는 RNA를 주형으로 하여 DNA를 합성하는 효소인데, 결과로 합성된 DNA를 상보성 DNA, 즉, cDNA라고 하며 여러 종류의 레트로 바이러스의 복제에 필수적인효소이다.

역전사효소

역전사효소는 ( )를 주형으로 하여 ( )를 합성하는 효소인데, 결과로 합성된 DNA를 ( ), 즉, ( )라고 하며 여러 종류의 ( )의 복제에 필수적인 효소이다. 일반적으로 ( )나 ( ) 등 두 종류의 역전사 효소가 상업적으로 개발되어 주로 사용된다.

RNA, DNA, 상보성DNA, cDNA, 레트로 바이러스, AMV, MMLV

역전사효소는 ( )이나 ( ) 등의 분자생물학 핵심 기술에 필수적으로 사용됨

cDNA라이브러리 제작, RT-PCR

재조합 DNA 분자 구축의 마지막 단계는 ( )에 의해 절단된 서로 다른 ( )를 연결하는 과정이다. DNA절편을 연결할 수 있는 방법은 여러 가지 있으나 ( )라고 불리는 DNA 연결효소에 의한 방법이 많이 사용된다.

제한효소, DNA분자, DNA 라이게이즈

라이게이즈는 ( )에서 생긴 틈을 메워주기 위한 효소, 즉 ( )로 절단된 두 ( )을 이어주는 작용을 하는 ( )이다.

DNA 사슬, 제한효소, DNA 단편, 효소

DNA라이게이즈가 DNA를 붙이는 분자적 작용과정은 어떻게 될까? 1) 점착성 말단의 경우 먼저 ( )에 의해 ( )가 ( )을 이루면 ( )가 그 틈을 메워주는 방식으로 두 DNA절편을 연결 2) 비점착성 발단의 경우, ( )을 연결하여 준다. 즉, 라이게이즈는 DNA분자 내의 ( )이나 제한효소로 절단된 부위의 ( )과 ( )사이에 ( )을 형성함으로써 ( )를 연결한다.

수소결합, 상보적인 염기, 쌍, 라이게이즈, 서로 맞붙은 두 DNA 절편, 틈, 3'-OH 말단, 5'-P말단, 인산다이에스터 결합, DNA 분자

DNA와 같이 전하를 띤 고분자 물질을 전기장을 띤 매질에서 이동 분리시켜 이들의 순도나 성질의 분석 및 분리 등에 사용하는 방법

전기영동

전기영동 - DNA는 구성성분인 ( )로 말미암아 DNA분자는 수용액에서 ( )를 띠므로 망상 구조의 반 고형상 지지판 위에 앉히고 전장을 걸어주면 DNA분자는 고체 지지체 내에서 ( ) 쪽으로 이동한다. 이때 사용하는 젤의 재료에 따라 전기영동은 크게 ( )와 ( )로 나누어진다.

인산기(PO4-), 음전하, 양쪽, 아가로오스 젤 전기영동, 아크릴아마이드 젤 전기영동

아가로오스 젤 전기영동은 ( )와 ( ) 등 ( )을 분리하는 전기영동이 젤 재료로 매우 유용하게 쓰인다. - ( ),( ),( )을 30% 글리세롤 용액에 녹여준다.

DNA, RNA, 핵, 염색시약, 브로모페놀 블루, 자일렌 사이아놀

아가로오스 젤에서 DNA의 염색과 보기 - 젤 상에서 DNA분자는 ( )에 의해염색되어 관찰될 수 있는데, 이는 EtBr이 DNA의 이중나선구조에 끼어들어 ( )를 비추면 형광을 나타내기 때문이다. - 전기영동시 젤 상에서 움직인 DNA를 정확한크기를 알기 위해 이미 크기를 알고 있는 ( )와 같이 전기영동을 한다. - 최근에는 돌연변이 유발원이 EtBr대신 ( )를 사용하고 있다. 이것은 ( )을 착색시키는데 사용되는 ( )염색약이다.

에티디움 브로마이드(EtBr), UV, 크기 표지자 DNA, SYBR, 핵산, 비대칭 사이아닌

아가로오스 젤 전기영동 시 핵산의 이동에 영향을 주는 요인은 1) ( ) 2) ( ) 3) 젤의 재료 - ( ), ( )등이 사용되고, DNA분자의 분리 관찰이나 단백질의 분리에는 주로 ( )가 이용 4) DNA구조 - 빨리 이동하는 순서 : ( )->( )-> ( )

DNA의 크기, 젤의 농도, 아가로오스, 폴리아크릴아마이드, 아크릴아마이드, 초나선 DNA, 선형DNA, 열려진 원형DNA

100

효모 인공염색체(YAC)DNA나 박테리아 인공염색체(BAC) DNA와 같은 거대분자는 일반적인 전기영동으로 분리하여 확인하는 것이 불가능하다 .이러한 거대 DNA 분자의 분리를 위해 개발된 전기영동법이 바로 ( )이다.

다면전기영동법(PFGE)

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원예7장. 생육의 조절

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問題一覧

DNA의 당-인산 골격은 ( )의 매우 단단한 ( )으로 연결되어 있는 반면 상보적인 두 가닥은 약한 ( )에 의해 서로 연결되어 있다.

인산다이에스터 결합, 공유결합, 수소 결합

수소결합, 분리, 단일가닥, 변성

고온, 높은 pH나 변성제에 의해 변성된 DNA는 적당한 조건 아래에서 원래의 상태로 회복될 수 있는데, 이러한 회복을 ( )이라고 한다.

재생

실제 DNA 용액에서 ( ) DNA 용액의 A260값이 1이라면 동일한 농도의 ( )DNA 용액의 그것은 이보다 높은 1.4정도가 된다.

이중가닥, 단일가닥

50%의 변성이 일어났을 때의 온도를 ( )라고 하면 Tm으로 표시한다.

변성온도

AT염기쌍, 결합, 3중 수소 결합, pH, DNA, 수소 결합, 수소 결합

다른 유래의 단일가닥 DNA가 상보적으로 결합하여 이중가닥 DNA를 형성하는 것을 ( )라고 부르며, 이 결합체를 ( )라고 한다

혼성화, 혼성 이중체

DNA의 모든 반응기는 사실 ( )에 위치하여 수소결합으로 고정되어 있으며, 그 주위를 ( )과 ( )이 둘러싸며 보호하는 형태를 가지고 있다.

나선 구조 중앙, 인산, 당

RNA의 당은 ( )로 2번과 3번 탄소에 모두 ( )가 연결되어 있다. 이러한 차이가 이 두분자의 안정성에 매우 큰 영향을 미치게 된다.

리보오스, OH기

2번 탄소, OH기, 알칼리, 당-인산 골격, 인산기, 당-인산 골격, 2번 탄소, OH기

RNase, RNA, DEPC, 히스티딘, 라이신, 시스테인, 타이로신

플라스미드 소량 분리법

유전체 DNA, 세포 용해액, 플라스미드 DNA, 분리, 농축

플라스미드 DNA분리 방법은 기본적으로 ( )와 ( ) 방법이 있다.

알칼리 용해, 끓이기

알칼리 용해방법 1) ( )를 파괴하는 ( ) 단계 2) ( )을 제거하고 ( )를 ( )시키는 단계 3) ( ) 단계 4) ( ) 단계

세포, 용해, 단백질, 박테리아 DNA, 변성, 중화, DNA 회수

단단한세포벽을 물리적인방법으로 분해하는 과정에서 ( )가 쉽게 잘려진다.

거대 유전자 DNA 분자

DNA를 분리하는 기본 과정 1) ( ) 2) ( ) 3) ( )에서의 ( )과 ( ) 등의 단계로 이루어짐

식물 분쇄, 세포용해, 용해된 세포, DNA 추출, 농축

액체 질소, 막자사발, 분쇄

0.5M, 불용성, 탄수화물, 단백질, 수용액

정리

분리된파지 입자로부터 DNA를 분리하기 위해 SDS와 단백질 가수분해효소 K로 먼저 단백질 껍질을 제거한 다음 ( ) 주로 사용한다.

페놀-클로로포름 추출법

전체 RNA의 분리방법은 ( )과 ( )을 ( )의 온도로 사용함으로써 Hot-phenol추출법이라고 한다.

추출 용액, 페놀, 65도

정리

퓨린, 피리미딘 염기, 방향족 구조, pH7, 핵산 수용액, 분광광도계, 흡수도

핵산의 순도를 측정하기 위해서 보통 260nm에서 흡광도뿐만 아니라 280nm에서의 흡솽도를 동시에 측정하여 OD( )/( )의 비율을 계산한다.

A260, A280

1.8, 2.0, 1.8, 페놀, thiocyanate, guanidine, 에탄올

정리

DNA의 절단과 연결, DNA증폭, RNA합성

DNA의 조작 기술에는 고도로 정제된 여러 효소를 이용하게 되며 , 가장 기본이 되는 유전자의 절단과 연결에는 ( )와 ( )가 필수적이다.

제한효소, 라이게이즈

( )는 핵산 분자를 절단하거나 또는 짧게 만드는 효소

핵산분해효소

핵산분해효소는 ( )를 절단하거나 또는 ( ) 만드는 효소

핵산 분자, 짧게

핵산분해효소는 핵산의 골격을 형성하는 ( )을 절단함으로써 핵산을 분해한다.

인산다이에스터 결합

핵산분해효소는 작용 방법에 따라 크게 ( )와 ( )로 구분되며, 작용하는 대상에 따라 ( )와 ( )로 구분한다.

핵산말단분해효소, 핵산내부분해효소, DNA 분해효소, RNA 분해효소

( )는 단일가닥의 DNA나 RNA를 분해하는 효소

S1뉴클리에이즈

핵산분해효소는 효소의 분류는 ( )이 있고, 여기에는 효소의 종류는 ( ) 등이 있다.

DNA 내부분해효소, 제한효소

중합효소는 효소의 분류는 ( )와 ( )가 있다. 중합효소는 DNA 중합효소에 효소의 종류에는 ( )가 있다.

DNA 중합효소, 역전사효소, Taq polymerase

라이게이즈 에 효소의 종류는 ( )가 있다.

T4 DNA 라이게이즈

단백질분해효소는 효소의 종류에는 ( )

프로티네이즈K

RNA분해효소는 ( ), ( ), ( )의 종류가 있다.

RNase H, RNase A, RNase T1

( )는 단일가닥 RNA를 절단하는 효소이다.

RNase A

RNase A는 DNA또는 RNA에서 ( )가 변화된 점 ( )를 감지하는 데 이용된다.

단일염기, 점돌연변이

RNase T1

RNase T1은 ( )의 ( )를 공격하여 인접한 염기와의 ( )을 절단하는 효소로서, DNA-RNA 혼성체나 RNA-RNA혼성체에서 혼성화되지 못한 ( )를 제거한다.

구아닌 염기, 3'인산기, 5' 인산결합, 단일가닥 RNA

박테리아가 침입해온 박테리오파지의 번식을 제한하는 작용을 ( )이라고 한다.

제한작용

박테리아 내부에 침투한 바이러스 DNA를 분해할 수 있느 ( )

제한효소

효소, 메틸기, 메틸화

( )는 특정 염기서열에서 DNA분자의 당-인산 골격을 끊는 기능을 가지는 효소이다.

제한효소

제한효소는 특정 염기서열에서 DNA분자의 ( )을 끊는 기능을 가지는 효소이다.

당-인산 골격

제한효소는 DNA분자 내부의 ( )을 절단하는 ( )의 일종이다. 제한효소의 DNA 인식 및 절단 부위는 ( )를 가진다.

인산다이에스터 결합, 핵산내부분해효소, 회문 구조

회문구조란 각 DNA가닥의 서열을 같은 방향으로 읽었을 때 ( )을 가지는 구조를 말한다.

똑같은 염기서열

점착성 말단, 비점착성 말단

5'말단, 돌출, 3'말단, smal절단 부위

인식 염기서열, 절단 부위, 절단 부위, 인식 부위, 절단 부위, 비대칭적 염기서열, 인식 염기서열

제한효소 이름은 그것이 분리된 ( ), ( ), ( )을 따서 짓는다.

미생물의 속명, 종명, 균주명

( )는 서로 다른 박테리아 균주로부터 분리된 효소로서 완충액의 종류나 온도 등 반응 조건 등이 다른 수 있다.

Isoschizomer

종류, 온도, neoschizomer

일부 제한효소는 서로 간에 인식 부위는 다르지만 상호 호환이 되어 ( )을 생성하기도 한다.

점착성 말단

제한효소 절단 부위를 DNA 상에 표시할 수 있는데, 이렇게 DNA상의 여러 다른 제한효소 자린의 위치를 나타낸 지도를 ( )라고 한다.

제한효소 지도

아연, 징크핑거

3염기, 4, 24, 한군데

유전자 가위, 유전체 교정

2000년대 초반에 개발된1세대 유전자 편집 기술이 ( ) 2010년대에 개발된 2세대 기술인 ( )과 2012년에 개발된 3세대 유전자 편집 기술인 ( )가 있다.

징크핑거 뉴클리에이즈, 탈렌, 크리스퍼

유전자 가위

제한효소, DNA서열, 가위

( )는 Fok1 제한효소 DNA 절단 도메인에 징크핑거 모듈을 이용하여 만들어지는 맞춤형 DNA인식 도메인을 결합한 것이다.

징크핑거 뉴클리에이즈

징크핑거 뉴클리에이즈는 ( )에 ( )을 이용하여 만들어지는 맞춤형 ( )을 결합한 것이다.

Fok1제한효소 DNA 절단 도메인, 징크핑거 모듈, DNA 인식 도메인

3, 염기, 한군데

징크핑거의 ( )과 ( )을 결합하여 개발된 ( )이다.

DNA인식 능력, 제한효소의 DNA 절단 능력, 유전자 가위

특정 서열을 인식하는 단백질은 식물의 병원균 세균인 ( )에서 발견한 ( )로 유래하였다.

Xan-thomonas, transcription activator-like effector

아미노산, 33, 35, 12번째, 13번째

뉴클리에이즈, Cas9 단백질

sgRNA, Cas9

sgRNA는 ( )와 ( ) 이외에도 ( )과 ( )을 포함해야 함

표적DNA, 상보적 서열, PAM, 상보적 서열

Cas9은 ( )와 결합한 가닥뿐 아니라 이 가닥과 ( ) 모두를 절단하므로 ( )를 자르게 된다.

sgRNA, 상보적 가닥, 이중가닥 DNA

( )는 ZFN과 TALEN보다 많은 장점이 있다.

크리스퍼 가위

크리스퍼 가위 장점 1) ( )개 붙일 수 있음 2) ( )하고 ( )이 적게 듦 3) ( )이 가능 4) ( )를 미리 예측할 수 있음

21, 간단, 시간, 다중 절단, 절단 자리

뉴클리에이즈는 ( ), 탈렌은 ( ), 크리스퍼는 ( )라고 함 뉴클리에이즈는 ( )라고함

ZFN, TALENs, (CRISPR/Cas9), 징크핑거 뉴클리에이즈

크리스퍼 가위의 단점 1) ( ) 중 ( )이 있는 곳만 절단 가능 2) ( )으로 ( )할 확률이 어느 정도 있음. ( )를 절단하는 확률이 있다. 3) ( )를 자름 4) ( )

유전체 서열, PAM서열, 비특이적, 절단, 비표적(표적 이외의 위치), 21개, 만들기 어려움

( )는 DNA나 RNA를 주형으로 하여 새로운 DNA가닥을 합성하는 효소

DNA 중합효소

DNA중합효소는 ( )나( )를 주형으로 하여 새로운 ( )을 합성하는 효소

DNA, RNA, DNA가닥

( )는 중합반응을 시작하기 위해 프라이머에 의해 이중가닥이 형성되어야만 작용한다.

중합효소

중합효소는 중합반응을 시작하기 위해 ( )에 의해 이중가닥이 형성되어야만 작용한다.

프라이머

DNA 중합효소, Taq중합효소, 역전사효소, 말단 디옥시뉴클레오타이드 전달효소

틈새번역

클레나우 절편

PCR에 필수 효소인 ( )는 주로 ( )에서 분리되는 효소로서, ( )에서도 매우 안정한 ( )이다.

열 안정성 중합효소, 호열성 고세균, 고온, 중합효소

Taq중합효소, 75, 80, 95, 10, 4

역전사효소

RNA, DNA, 상보성DNA, cDNA, 레트로 바이러스, AMV, MMLV

역전사효소는 ( )이나 ( ) 등의 분자생물학 핵심 기술에 필수적으로 사용됨

cDNA라이브러리 제작, RT-PCR

제한효소, DNA분자, DNA 라이게이즈

라이게이즈는 ( )에서 생긴 틈을 메워주기 위한 효소, 즉 ( )로 절단된 두 ( )을 이어주는 작용을 하는 ( )이다.

DNA 사슬, 제한효소, DNA 단편, 효소

수소결합, 상보적인 염기, 쌍, 라이게이즈, 서로 맞붙은 두 DNA 절편, 틈, 3'-OH 말단, 5'-P말단, 인산다이에스터 결합, DNA 분자

DNA와 같이 전하를 띤 고분자 물질을 전기장을 띤 매질에서 이동 분리시켜 이들의 순도나 성질의 분석 및 분리 등에 사용하는 방법

전기영동

인산기(PO4-), 음전하, 양쪽, 아가로오스 젤 전기영동, 아크릴아마이드 젤 전기영동

아가로오스 젤 전기영동은 ( )와 ( ) 등 ( )을 분리하는 전기영동이 젤 재료로 매우 유용하게 쓰인다. - ( ),( ),( )을 30% 글리세롤 용액에 녹여준다.

DNA, RNA, 핵, 염색시약, 브로모페놀 블루, 자일렌 사이아놀

에티디움 브로마이드(EtBr), UV, 크기 표지자 DNA, SYBR, 핵산, 비대칭 사이아닌

DNA의 크기, 젤의 농도, 아가로오스, 폴리아크릴아마이드, 아크릴아마이드, 초나선 DNA, 선형DNA, 열려진 원형DNA

100

다면전기영동법(PFGE)