제7장. 유전자 획득/ 제15장. 식물 유전공학

82問 • 10ヶ月前

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( )일나 여러 유전자 집합에서 한 종류의 유전자를 분리하고 증폭하는 과정이다.

유전자 클로닝

DNA분자 하나가 하나의 숙주세포 안으로 들어가도록 하는 유전자 도입과정을 거쳐 특정 DNA를 포함하는 숙주세포의 집합체를 선별하게 되는데 이 집합체를 ( )이라고 하고, 이런 클론을 얻는 과정을 ( )이라고 한다.

클론, 클로닝

DNA분자 하나가 하나의 숙주세포 안으로 들어가도고 하는 유전자 도입과정을 거쳐 특정 DNA를 포함하는 숙주세포의 집합체를 선별하게 되는데 이 집합체를 ( )라고 하며, 이런 클론을 얻는 과정을 ( )이라고 한다.

클론, 클로닝

유전자 라이브러리의 스크리닝에 의하지 않고도 유전자를 빠르게 얻을 수 있는 방법으로는 ( )이 있다.

중합효소 연쇄반응법(PCR)

중합효소 연쇄반응법은 DNA의 염기서열 정보와 미량의 DNA라도 있을 경우 이표적 DNA를 증폭하여 최종적으로 벡터에 넣을 수 있으므로 또 다른 형태의 ( )이라 할 수 있다.

유전자 클로닝 방법

PCR의 개요는 ( )와 ( )를 이용하여 ( ) 시간 내에 미량의 시료에서 DNA를 증폭시켜 다량의 DNA를 얻을 수 있는 방법이다.

프라이머, 내열성 DNA 중합효소, 짧은

PCR은 DNA를 ( )시킨 다음 , 프라이머를 표적 DNA에 ( )시키고, 중합효소를 이용하여 DNA사슬을 ( )시키면, 한 분자의 DNA가 두 분자로 증폭된다.

변성, 결합, 신장

PCR이 이루어지려면 필요한것 1) ( ), 2) ( )3) ( ) 4) ( )

DNA 주형가닥, 프라이머, 중합효소, DNTP

PCR기계는 여러 사이클을 자동으로 수행할 수 있도록 되어 있다. PCR단계의 변성과정에서 PCR반응 혼합물은 ( )되었다가 프라이머 결합단계에서는 ( )로 DNA 사슬의 ( )단계에서는 온도를 조금 더 올려 진행되었다.

가열, 낮은 온도, 신장

PCR은 ( )-> ( )-> ( )단계로 진행

변성, 결합, 신장

PCR은 - ( )를 변성시킨 다음-> ( )를 ( )에 결합시키고-> ( )를 이용하여 ( )을 신장시켜 한 분자의 DNA가 두 분자로 ( )된다.

DNA, 프라이머, 표적 DNA, 중합효소, DNA사슬, 증폭

PCR - 변성과정의 온도는 ( )도에서 ( )초 - 결합단계에서는 ( )도에서 ( )분 - 신장단계에서는 ( )도에서 ( )분

94, 30, 55, 1, 72, 1

PCR 은 유전자 획득 외의 기능 1) ( ) 검출 2) ( ) 제조 3) ( )의 ( ) 및 ( ) 4) ( ) 5) ( )

- 유전자 돌연변이 검출 - 돌연변이 제조 - mRNA의 검출 및 정량화 - 유전자의 메틸화 - 유전자 패턴 검사

PCR장점 1) ( )에서 ( )를 얻을 수 있다. 2) ( )가 매우 넓다. 3) ( )의 존재 여부, ( ) 여부를 진단하는데 쓰임 4) ( )에 PCR법이 효율적으로 쓰임 5) ( ) 및 ( )를 결정하는데 유용하게 쓰임 6) ( )를 획득하는 것 이외에도 ( )에 ( )를 일으킬 때 많이 쓰임

미량의 DNA, 다량의 DNA, 적용 범위, 유전병, 유전자 돌연변이, 위치지정 돌연변이 유발, , 유전자의 발현 여부, 발현 정도, 유전자, DNA, 돌연변이

PCR에 사용되는 효소는?

Taq 중합효소

내열성 DNA중합효소로 많이 사용되는 것은 ( )로서 뜨거운 온천에 사는 호열성 세균인 Thermus aquaticus에서 추출한 dna중합효소이다.

Taq 중합효소

Taq중합효소 단점 1) ( )이다. : ( )-> ( )방향으로 ( ) 및 ( )이 없기 때문 2) DNA크기도 ( )이하로 제한 : ( )에서 부정합이 일어나면 그 후의 ( )이 저해됨

낮은 정확도, 3', 5', 핵산 분해, 교정 기능, 2kb, 3'말단, 합성

taq과 Tth는 ( )기능은 있으나 ( ) 및 ( )이 없다. 이들 효소는 모두 ( )은 비교적 낮은 편이나 ( )는 비교적 빠른 편이다.

5'-> 3' 말단분해효소, 3'-> 5'말단분해효소 기능, 교정기능, 열안전성, DNA중합속도

Deep vent나 Pfu의 특징 1) ( )이 매우 크고 2) ( )이 있고 3) ( )는 비교적 느린 편이다.

내열성, 3'-> 5' 말단분해효소 기능, DNA중합속도

Deep vent는 ( )을 Pfu는 뛰어난 ( )를 가지고 있다.

높은 내열성, 정확도

DNA를 표적으로 할 때는 프라이머의 길이가 17bp이상 되어야 하는 이유? - DNA에 ( )하고 DNA를 ( )할 수 있기 때문에 - ( )인 DNA를 증폭하는 것이 중요

결합, 증폭, 특이적

PCR 온도 조건이다. 특히 프라이머가 표적 DNA에 잘 결합할 수 있는 온도를 결정해야 한다. 최적 결합온도는 실험적으로 결정하지만 일반적으로 두 프라이머의 ( ) 값 중 낮은 것으로 부터 ( ) 정도 낮은 것이 최적이다.

Tm, 5도

PCR에서 Tm값이 많이 차이가 나면 PCR에 의한 증폭이 어렵다. 이보다 낮은 온도에서는 프라이머가 표적 DNA에 비특이적으로 결합할 수 있기 때문에 PCR시작을 높이는 온도에서 시작하면서 프라이머의 결합 온도까지 내리는 방식을 ( )라고 한다.

hot start PCR

PCR에서 금속 이온의 종류와 농도 그리고 dNTP의 농도 조건도 PCR최적화에 중요하다. 보통 내열성 중합효소는 일반적으로 중합효소와 마찬가지로 ( )이온을 요구한느데, 1~2mM정도의 농도가 적당하다.

마그네슘

PCR은 프라이머를 필요로 하기 때문에 이미 ( )이 알려진 ( )만을 증폭할 수 있다는 단점이 있다.

염기서열, DNA

PCR로 유용 유전자를 얻는 경우 반드시 ( )를 확인해야 한다.

유전자 염기서열

PCR을 통해서 원하는 DNA를 증폭하여 얻을 수 있지만 DNA를 ( )에 넣어야 할 경우도 있따. 또한 PCR산물을 ( )로 삽입해야 할 경우도 있다. -> 이런 경우 표적 DNA에 적절한제한효소 자리가 없다고 할 때 어떤방법으로 벡터에 삽입해야 하는가? 세 가지 정도의 방식이 잘 알려져 있다. 1) ( )가 있는 ( )를 이용하는 방법 2) ( )를 이용하는 방법 3) ( )와 연결된 벡터를 이용하는 방법

클로닝 벡터, 발현 벡터, 제한효소 자리, 프라이머, TA클로닝벡터, 토포아이소머레이즈

제한효소가 있는 프라이머를 이용하는 방법 - 먼저 ( )쪽에 ( )가 신장된 프라이머를 합성한다. - 이 프라이머를 이용하여 PCR을 수행할 떄 이 제한효소 자리가 NA합성에 장애를 주지 않으므로 PCR산물의 양 말단에 ( )가 생성된다.

5', 제한효소, 제한효소 자리

TA클로닝 방법 - Taq또는 Tth중합효소와 같은 ( )는 ( )-> ( )으로 중합할 때 ( )기느이 없기 때문에 흔히 PCR산물의 ( )말단에 하나의 ( )을 첨가하는 경향이있다.

열 안정성 중합효소, 5', 3', 교정 판독, 3', 아데닌

TA 클로닝 방법 - 이 벡터는 PCR산물과 상보적이 되고, 돌출된T 때문에 벡터가 삽입체 없이 스스로 연결되지 않으므로 배교적 늪은 효율로 클로닝된다. 이러한 방법을 ( )이라고 하고, 여기에 사용된 벡터를 ( )라고 한다.

TA클로닝, T-벡터

( )은 유전체 DNA가 제한효소로 절단될 때 생기는 DNA조각의 크기와 숫자가 다른 것을 말함

제한효소 절편길이 다형성(RFLP)

광합성을 수행하는 ( )와 물질을 저장과 분해, 세포 생장에 중요한역할을 하는 아주 잘 발달된 ( )를 가지고 있다.

엽록체, 중심액포

식물세포의 세포막 외부에는 두꺼운 ( )이 존재하고, 세포벽에는 ( )라고 하는 구멍이 있어 인접한 세포와 세포질을 연결한다. 식물씨앗의 지방 조직에는 지방산을 당으로 바꾸는 기능을 담당하는 동물의 퍼옥시좀의 변형체인 ( )이라는 소기관이 발견되었따.

세포벽, 원형질연락사, 글리옥시좀

세포 전체의 형태를 형성하거나 식물을 재생하는 능력을 ( )라고 한다.

전형성능

형질전환방법은 ( )을 이용하여 DNA를 도입하게 되므로 식물 조직 배양을 수반하게 된다. 즉, 외부 유전자가 도입된 절편을 배양하여 ( )를 형성시키고, 어린 식물을 분화시킨 다음 큰 식물로 키운다.

식물 절편, 캘러스

캘러스의 미분화 상태를 유지하기 위해서는 ( )과 ( )과 같은 생장호르몬을 적절히 사용해야 한다.

옥신, 시토키닌

형질전환 방법에는 ( )이용 방법, ( ), ( ) 또는 ( )등을 이용하여 식물세포 DNA를 직접 넣는 방법, 원형질체를 이용한세포융합, in planta형질전환법, 엽록체 형질전환법, 바이러스를 이용하여 식물세포 내로 외부 유전자를 도입하는 방법 등이 있따.

애그로박테리아, 유전자총, 전기충격, 폴리에틸렌글라이콜(PEG)

1) 아그로박테리아를 이용한 방법은 조직배양이 ( )하고, 특징은 ( )을 이용한다. 2) in planta 형질전환법은 조직배양이 ( ), 특징은 ( )와 같은 작은 식물 또는 ( )에 적용한다.

필요, Ti플라스미드, 필요없고, 애기장대, 어린식물체

식물 형질전환에 가장 많이 이용되는 방법은?

아그로박테리아

식물 형질전환에 가장 많이 이용되는 방법은 아그로박테리아라는 ( )을 이용하는 방법이다. ( a )이란 식물의 뿌리와 줄기의 경계면에 생기는 혹 모양이 종양을 말한다. a는(은) ( )과 같은 항생물질로 아그로박테리아를 모두 제거해도 배지 내에 살 수 있으며, 또한 암종의 특성을 그대로 가지고 있어 근두암종 생장은 박테리아에 의한 것이라 볼 수 없다.

토양미생물, 근두암종, 카베니실린

아그로박테리아는 ( )라는 약 200kb이상이 되는 ( )를 가지고 있으며, 이 플라스미드에는 ( )라는 부분이 있는데, 이 T-DNA는 각각 ( )의 ( )와 ( )에 의해 구분된다.

Ti플라스미드, 거대 플라스미드, T-DNA, 25bp, 왼쪽 경계, 오른쪽 경계

Ti플라스미드는 T-DNA이외에 T-DNA의 식물 유전체 DNA 상입에 필요한 여러 유전자들을 포함하고 있는데, 이러한 유전자를 ( )라고 한다.

vir유전자

아그로박테리아 Ti플라스미드의 T-DNA상에 있는 유전자는 식물 유전체로 삽입된 후 박테리아의 먹이가 되는 ( )을 생성하고, 또한 식물에서의 빠른 세포분열이 일어나도록한다.

오파인

( ) 또는 ( )을 암호화하는 유전자와 식물호르몬(옥신과 시토키닌)을 암호화하는 유전자가 Ti플라스미드의 T-DNA부위에 존재한다.

옥토파인, 노팔라인

T-DNA는 식물 유전체에 삽입된 후 ( )과 ( )으로 식물세포를 빠르게 증식시키며 이렇게 증식된 식물세포는 박테리아의 먹이인 ( )을 합성하여 분비한다.

옥신, 시토키닌 합성, 오파인

식물 형질전화용 벡터의 문제점 1) ( )이상이 되는 크기 2) ( )로 인해 시험관내 재조합 벡터를 만들기 위해 Ti플라스미드를 조작하기 어렵다는 문제가 있음

200kb, 수많은 제한효소 자리

식물 형질전환용 벡터의 문제점을 극복하기 위해 고안된 것이 ( )이다. ( )은 T-DNA의 이동에 필요한 vir유전자들이 동일한플라스미드에 존재해야 할 필요가 없다는 사실에 근거

바이너리 벡터시스템, 바이너리 벡터시스템

( )은 T-DNA이동에 필요한vir유전자들이 동일한 플라스미드에 존재할 필요가 없으므로 vir유전자를 별도의 플라스미드가 존재할 필요 없음

바이너리 벡터시스템

n, A, tumefaciens의 Ti플라스미드는 200kb이상 크고, 수많은 제한효소로 인해 재조합 벡터를 만들기 위해 고안된것

바이너리 벡터

( )는 별도의 플라스미드 형태로 애그로박테리아 내에 도입하고 놓고 단지 T-DNA부분만 작은 E. coli 플라스미드 벡터에 클로닝시켜 조작에 편리하게 한 시스템이다.

vir유전자

대표적인 바이너리 벡터의 하나인 ( )은 약 12kb의 크기와 많은 제한효소자리(MCS)를 가지므로 매우 편리하게 재조합 벡터의 구축을 위한 조작을 할 수 있게 된다.

pBI101

T-DNA가 아그로박테리아로부터 이동하여 식물 유전체로 삽입되는 과정 1) ( )가 숙주를 인지하고( )한다. 2) 특정 식물 신호를 ( ) 한다. 3) ( )과 ( )을 활성화시킨다. 4) ( )을 형성한다. 5) VirB-VirD4수송 복합체가 만들어지고 T가닥과 Vir단백질이 숙주 세포질로 들어간다. 6) 성숙한T복합체를 형성한다. 7) ( )는 ( )을 거쳐 ( )으로 이동한다. 8) ( )가 분해되고 ( ) 속으로 삽입된다.

아그로박테리아, 연결, 감지, 신호 전달, vir유전자 발현, T가닥, T복합체, 세포질, 핵, T복합체, 식물 유전체

형질전환체를 선발하기 위해서는 보통 ( )를 도입하고자 하는 유전자와 함꼐 식물세포를 도입한다.

선발 표지 유전자

정리

( )는 작용 양식에 따라 크게 양성선발과 음성선발로 나눈다.

선발표지자

( )는 비형질 전환체를 제거하는 방식이고, ( )은 비형질전환체를 제거하는것이 아니라 형질전환체만을 선발하는 방식이다.

음성선발, 양성선발

음성선발은 ( )를 제거하는 방식으로써 ( )나 ( )를 이용한다. 양성선발은 ( )를 제거하는 것이 아니라 ( )만을 선발하는 방식이다.

비형질 전환체, 항생제, 제초제 저항성 표지자, 비형질 전환체, 형질전환체

항생제 저항성 선발표지 유전자 중 hpt에서 벼는 ( )에서 죽음 즉, ( )는 죽는다.

하이그로마이신 저항성, 외떡잎

애그로박테리아 식물 형질전환과정 1) ( ) 확인 2) ( ) 삽입여부 3) ( ) 4) ( ) 5) ( )

선발 표지 물질 저항성, 도입 유전자, 도입 유전자 전사 확인, 도입 유전자 단백질, 형질전환체의 생리가능 점검

( )은 외래 유전자(DNA)를 미세한텅스텐입자에 바른 후 유전자 총에 넣고 발사하면 DNA로 코팅된 금속 입자가 밀려나가게 되고 정지단에 부딪치면서 흩어진다.

유전자총을 이용한 방법

( )는 세포벽이 제거되어 세포막만을 가지고 있는 식물체

원형질체

원형질체는 ( ),( ),( ) 등으로부터 효소혼합액을 사용하여 ( )한다.

엽육세포, 캘러스, 현탁세포, 분리

효소혼합액은 주로 세포벽의 주요 성분인 ( )를 분해하는 셀룰로오스,, ( )을 분해하는 펙티네이즈, ( )를 분해하는 헤미셀룰레이즈이다.

셀룰로오스, 펙틴, 헤미셀룰로오스

원형질체 형질전환 ( )과 같은 물질은 가하거나 짧고 강한 전류를 흘려주어 유용 유전자를 포함한 외부의 재조합 DNA를 세포 내로 도입할 수 있으며, 형질전환된원형질체는 선발배지를 이용하여 완전한 식물 개체로 재분화시킬 수 있다.

폴리에틸렌글라이콜(PEG)

( )은 흡수력이 강하여 ( )에 세포가 위치하면 세포막을 변성을 가져와 순간적으로 PEG수용액을 첨가되어 있는 DNA가 세포 내로 전달이 이루어진다.

폴리에틸렌글라이콜(PEG), 고농도 PEG용액

폴리에틸렌글라이콜(PEG)는 ( )이다.

세포융합 촉진제

원형질체 형질전환 문제점은 ( )과 ( )이다.

낮은 효율성, 재현성

종류가 서로 다른 두 세포를 하나로 합쳐서 새로운 혼성세포를 만드는 것을 ( )라고 한다.

세포융합

식물세포를 융합시키려면 세포벽이 제거된 원형질체를 이용해야 한다. 두 종류의 원형질체에 세포융합 촉진제인 ( )을 처리하여 융합시킨 후 재생배지로 옮겨서 배양하면 융합된세포에 세포벽이 다시 생긴다.

폴리에틸렌글라이콜(PEG)

원형질체를 이용항 세포융합에서 - 외형상의 차이점을 이용하여 현미경아래에서 분리하는 ( ), -각각 다른 형광물질이 포함된 두 가지 원형질체를 융합시킨 후 검색기로 통과시키면 파장에 따라 다르게 분류되는 원리를 이용한 ( ) - ( ) 및 ( )에 의한선발 - ( )에 의한선발 방법

흡입식 선발 방법, 형광세포 분류, 항생제 민감성 및 저항성에 의한 선발, 부력밀도

조직배양 중 ( )에서 체세포 변이 등의 문제점이 생기기도 하며, ( )와 같은 ( )가 나타나기도 한다.

재분화과정, DNA메틸화, 후성적 변화

( )란 조직배양을 거치지 않고 식물이 생각하는 상태 그대로에서 생식세포를 형성하는 세포를 형질전환시켜 결과적으로 외부 유전자가 생식세포나 또는 초기배세포의 유전체 속으로 삽입되어 형질전환된 씨를 얻을 수 있게 하는 기술

in planta 형질전환

in planta형질전환기술은 ( )을 거치지 않고 식물이 생장하는 상태 그대로에서 ( )를 형성하는 세포를 ( )시켜 결과적으로 ( )가 ( )나 또는 초기 ( )의 유전체 속으로 삽입되어 ( )를 얻을 수 있게 하는 기술

조직배양, 생식세포, 형질전환, 외부 유전자, 생식세포, 배세포, 형질전환된 씨

( )는 아그로박테리아가 포함된 배양체에 식물의 씨앗을 넣어준 후 이 씨앗을 발아시켜 형질전환체를 얻는 방법

씨앗침지법

( )은 형질전환시키고자 하는 식물의 수분되지 않은 꽃을 박테리아 현탁액에 거꾸로 담가 박테리아가 식물의 여러 조직 속으로 침투하게 하여 형질전환하는 방법

화아침지법

( )는 식물의 수분되지 않은 꽃을 박테리아 현탁액에 거꾸로 담근 상태에서 진공을 걸어주는 방법

진공 침투법

화아침지법처럼 식물의 수분되지 않은 꽃을 박테리아 현탁액에 거꾸로 담그는 대신 박테리아 현탁액을 스프레이로 열리지 않은 꽃봉오리에 뿌려주는 ( )을 주로 이용

화아분무법

엽록체 유전체 DNA는 핵 유전체 DNA와 달리 ( )이 일어나며, 이러한 사실에 근거하여 ( )방법이 개발되었다.

상동재조합, 엽록체 형질전환

엽록체 형질전환의 장점 1) ( )의 생성을 근본적으로 막음 2) ( )를 가지기 때문에 엽록체 형질전환체는 ( )보다 월등한 높은 유전자 발현을 보임 3) ( )이나 ( )등이 보이지 않음

슈퍼잡초, 많은 수, 핵 형질전환체, 유전자 발현정지 현상, 위치 효과

엽록체 형질전환 단점 1) ( )이 낮음 2) ( )로 삽입되어 ( )이면서 동시에 ( )가 생겨날 가능성이 있음

형질전환 효율, 핵 유전체, 엽록체 형질전환체, 핵 유전자 변이체

대부분 식물 바이러스는 ( )이다.

RNA 바이러스

물러지지 않느 토마토는 ( )기술을 사용하여 PG유전자의 발현을 억제하는 방식으로 개발됨

An-tisense RNA

제1장. 원예학 서설

ユーザ名非公開 · 11問 · 1年前

제1장. 원예학 서설