問題一覧
1
Gram 染色（Hucker-Conn法、Brown-Hopps法）：
グラム陽性菌をA色、グラム陰性菌をB色に染色する。
濃青, 赤
2
methylene blue 染色：
メチレン青（塩基性色素：正荷電）と細菌（負荷電）の親和性を利用。
細菌、真菌、核、細胞質：A色（B）
青, メチレン青
3
Gram染色（Hucker-Conn法、 Brown-Hopps法） 基本的な一般細菌染色
染色原理
陽性菌（ペプチドグリカン層が厚い）と陰性菌（リポ多糖・リポ蛋白が多い）の細胞壁の構造の違いを利用。
→Aで染色された菌体をアセトンで処理すると陰性菌はBをされる。
→塩基性フクシンまたはサフラニン0で後染色すると、陰性菌はC色に染色される（陽性菌はクリスタル紫で染色された青のまま染色性保持）
クリスタル紫, 脱色, 赤
4
染色手順【Brown-Hopps法】
① 脱パラ、脱キシ、親水
②A
③ルゴール液（ヨウ化）
④アセトン（脱色）
⑤ B
⑥ Gallego液（ホルマリン原液＋氷酢酸）（分別）
⑦アセトン（脱水）
⑧ ピクリン酸・アセトン液（後染色）
⑨透徹、封入
染色結果
グラム陽性菌：濃青色（クリスタル紫）
グラム陰性菌：赤色（塩基性フクシン）
背景：全体は黄色（ピクリン酸）、細胞の核は赤色
1%クリスタル紫, 塩基性フクシン液
5
Ziehi-Neelsen染色
抗酸菌（A Mycobacterium tuberculosisを含む）の染色法
染色原理
抗酸菌の細胞壁は不飽和脂肪酸や多糖類に富む。
→水溶性色素液では染色できない。酸に抵抗性をもつ（B）
→石炭酸（フェノール：親水性・親油性）と混合した色素（C）によって染色する。＝D
結核菌, 抗酸菌, 塩基性フクシン, 石灰酸フクシン
6
Ziehi-Neelsen染色
染色手順
①脱パラ（手早く）、脱キシ（手早く）、親水
②A
③1%塩酸アルコール（分別）
④B（後染色）
⑤90%エタノールから脱水、透徹、封入（手早く）
染色結果
抗酸菌（結核菌を含む）：赤色（石炭酸フクシン）
抗酸菌以外の細菌、その他細胞質・核：青色（メチレン青）
石灰酸フクシン, メチレン青液
7
ローダミンB・オーラミン0重染色（蛍光染色）
A（結核菌 Mycobacterium tuberculosisを含む）の染色法で、抗酸菌が蛍光色素との親和性を持つことを利用した
染色法。
Bで観察：黄緑色～橙黄色蛍光
抗酸菌, 蛍光顕微鏡
8
Warthin-Starry染色
A溶液を用いた鍍銀染色
Hpylori、スピロヘータ（梅毒スピロヘータ含む）が黒褐色～黒色に染色される。
※梅毒スピロヘータ（Treponema pallidum）。
硝酸銀
9
Grocott 染色
代表的な真菌の染色法。
切片の厚さは4～6μm（薄すぎると菌体の構造が不明瞭）
染色原理
A液を用いた鍍銀染色。
→Bで真菌の細胞壁の多糖類を酸化
→生じたアルデヒド基にAが反応
（真菌以外のPAS反応陽性物質の多くはクロム酸の強い酸化により、アルデヒド基→カルボキシル基が生成
され陰性化）
→銀還元性反応により自己還元作用（還元剤不要）
→金属銀の粒子として菌体を黒～黒褐色に染色
メセナミン銀, クロム酸
10
Grocott 染色
染色手順
①脱パラ（キシレン手早く）、脱キシ、親水
②A（酸化）
③1%亜硫酸水素ナトリウム水溶液（還元）
④B（鍍銀65°C加温）
⑤0.1%塩化金水溶液（調色）
⑥2%チオ硫酸ナトリウム（定着）
⑦C（後染色）
⑧90%エタノールから脱水、透徹、封入
染色結果
カンジダ、アスペルギルス、クリプトコッカス、ニューモシスチス・イロベチ、／カルジア、放線菌な
ど：黒褐色～黒色（メセナミン銀）
5%クロム酸, メセナミン銀液, ライトグリーン液
11
HBS抗原染色法
肝細胞内でのHBS抗原の分布は不規則である。核内には染まらない。
・orcein染色（茶褐色）
・ Victoria blue染色（青色）
• aldehyde fuchsin染色（紫色）
↓
すべて
A染色法
弾性線維
12
神経組織染色法
神経組織とは：
神経細胞と神経膠細胞より構成される。
神経細胞（neuron）
→ 神経細胞体、軸索、状突起
・軸素はA（脂質に富む絶縁体）に囲まれている。
・神経細胞体の細胞質にはB（ニッスル顆
粒、粗面小胞体）と神経原線維を含む。
髄鞘, ニッスル小体
13
cresyl violet 染色
神経細胞内（核周囲）に存在する粗面小胞体の集合体であるA（顆粒）を染める染色。
ニッスル小体、細胞核などをクレシル紫で紫色に染色する。
切片の厚みは厚め（B）が望ましい。
神経細胞の分布や増減、中心性色質融解の観察に有用。
ニッスル小体, 6〜10μm
14
Kliiver-Barrera染色
AとBを染め分ける染色。
髄鞘をCで青色に、ニッスル小体、細胞核などをD、で紫色に染色する。
切片の厚みはE（6～10um）が望ましい。
ルクソール・ファースト青液は56°Cで加温しながら染色
する（加温染色）。
ルクソール・ファースト青は共染を生じるため炭酸リチウムとエタノールを用いて分別する。
脱髄疾患など（多発性硬化症やギラン・バレー症候群など）における髄鞘の障害の有無や程度を見る。（病変部のみ明るく抜けて見える）
髄鞘, ニッスル小体, ルクソール・ファースト青, クレシル紫, 厚め
15
Bodian染色
神経原線維、軸索、劇状突起、神経末梢を赤褐色～黒褐
色に染色する。特にアルツハイマー病の老人班や、神経原線維変化を検索する。
切片の厚みはA（8～12μm）
が望ましい。
Bを用いた銀反応液を使用する（C不使用の銀反応液）。
プロテイン銀液中に、触媒樹状突起として銅片を沈める。
還元液には、ハイドロキノン・硫酸ナトリウムを使用。
神経原線維
酸化剤を必要としない。
厚め, プロテイン銀, 硝酸銀
問題一覧
1
Gram 染色（Hucker-Conn法、Brown-Hopps法）：
グラム陽性菌をA色、グラム陰性菌をB色に染色する。
濃青, 赤
2
methylene blue 染色：
メチレン青（塩基性色素：正荷電）と細菌（負荷電）の親和性を利用。
細菌、真菌、核、細胞質：A色（B）
青, メチレン青
3
Gram染色（Hucker-Conn法、 Brown-Hopps法） 基本的な一般細菌染色
染色原理
陽性菌（ペプチドグリカン層が厚い）と陰性菌（リポ多糖・リポ蛋白が多い）の細胞壁の構造の違いを利用。
→Aで染色された菌体をアセトンで処理すると陰性菌はBをされる。
→塩基性フクシンまたはサフラニン0で後染色すると、陰性菌はC色に染色される（陽性菌はクリスタル紫で染色された青のまま染色性保持）
クリスタル紫, 脱色, 赤
4
染色手順【Brown-Hopps法】
① 脱パラ、脱キシ、親水
②A
③ルゴール液（ヨウ化）
④アセトン（脱色）
⑤ B
⑥ Gallego液（ホルマリン原液＋氷酢酸）（分別）
⑦アセトン（脱水）
⑧ ピクリン酸・アセトン液（後染色）
⑨透徹、封入
染色結果
グラム陽性菌：濃青色（クリスタル紫）
グラム陰性菌：赤色（塩基性フクシン）
背景：全体は黄色（ピクリン酸）、細胞の核は赤色
1%クリスタル紫, 塩基性フクシン液
5
Ziehi-Neelsen染色
抗酸菌（A Mycobacterium tuberculosisを含む）の染色法
染色原理
抗酸菌の細胞壁は不飽和脂肪酸や多糖類に富む。
→水溶性色素液では染色できない。酸に抵抗性をもつ（B）
→石炭酸（フェノール：親水性・親油性）と混合した色素（C）によって染色する。＝D
結核菌, 抗酸菌, 塩基性フクシン, 石灰酸フクシン
6
Ziehi-Neelsen染色
染色手順
①脱パラ（手早く）、脱キシ（手早く）、親水
②A
③1%塩酸アルコール（分別）
④B（後染色）
⑤90%エタノールから脱水、透徹、封入（手早く）
染色結果
抗酸菌（結核菌を含む）：赤色（石炭酸フクシン）
抗酸菌以外の細菌、その他細胞質・核：青色（メチレン青）
石灰酸フクシン, メチレン青液
7
ローダミンB・オーラミン0重染色（蛍光染色）
A（結核菌 Mycobacterium tuberculosisを含む）の染色法で、抗酸菌が蛍光色素との親和性を持つことを利用した
染色法。
Bで観察：黄緑色～橙黄色蛍光
抗酸菌, 蛍光顕微鏡
8
Warthin-Starry染色
A溶液を用いた鍍銀染色
Hpylori、スピロヘータ（梅毒スピロヘータ含む）が黒褐色～黒色に染色される。
※梅毒スピロヘータ（Treponema pallidum）。
硝酸銀
9
Grocott 染色
代表的な真菌の染色法。
切片の厚さは4～6μm（薄すぎると菌体の構造が不明瞭）
染色原理
A液を用いた鍍銀染色。
→Bで真菌の細胞壁の多糖類を酸化
→生じたアルデヒド基にAが反応
（真菌以外のPAS反応陽性物質の多くはクロム酸の強い酸化により、アルデヒド基→カルボキシル基が生成
され陰性化）
→銀還元性反応により自己還元作用（還元剤不要）
→金属銀の粒子として菌体を黒～黒褐色に染色
メセナミン銀, クロム酸
10
Grocott 染色
染色手順
①脱パラ（キシレン手早く）、脱キシ、親水
②A（酸化）
③1%亜硫酸水素ナトリウム水溶液（還元）
④B（鍍銀65°C加温）
⑤0.1%塩化金水溶液（調色）
⑥2%チオ硫酸ナトリウム（定着）
⑦C（後染色）
⑧90%エタノールから脱水、透徹、封入
染色結果
カンジダ、アスペルギルス、クリプトコッカス、ニューモシスチス・イロベチ、／カルジア、放線菌な
ど：黒褐色～黒色（メセナミン銀）
5%クロム酸, メセナミン銀液, ライトグリーン液
11
HBS抗原染色法
肝細胞内でのHBS抗原の分布は不規則である。核内には染まらない。
・orcein染色（茶褐色）
・ Victoria blue染色（青色）
• aldehyde fuchsin染色（紫色）
↓
すべて
A染色法
弾性線維
12
神経組織染色法
神経組織とは：
神経細胞と神経膠細胞より構成される。
神経細胞（neuron）
→ 神経細胞体、軸索、状突起
・軸素はA（脂質に富む絶縁体）に囲まれている。
・神経細胞体の細胞質にはB（ニッスル顆
粒、粗面小胞体）と神経原線維を含む。
髄鞘, ニッスル小体
13
cresyl violet 染色
神経細胞内（核周囲）に存在する粗面小胞体の集合体であるA（顆粒）を染める染色。
ニッスル小体、細胞核などをクレシル紫で紫色に染色する。
切片の厚みは厚め（B）が望ましい。
神経細胞の分布や増減、中心性色質融解の観察に有用。
ニッスル小体, 6〜10μm
14
Kliiver-Barrera染色
AとBを染め分ける染色。
髄鞘をCで青色に、ニッスル小体、細胞核などをD、で紫色に染色する。
切片の厚みはE（6～10um）が望ましい。
ルクソール・ファースト青液は56°Cで加温しながら染色
する（加温染色）。
ルクソール・ファースト青は共染を生じるため炭酸リチウムとエタノールを用いて分別する。
脱髄疾患など（多発性硬化症やギラン・バレー症候群など）における髄鞘の障害の有無や程度を見る。（病変部のみ明るく抜けて見える）
髄鞘, ニッスル小体, ルクソール・ファースト青, クレシル紫, 厚め
15
Bodian染色
神経原線維、軸索、劇状突起、神経末梢を赤褐色～黒褐
色に染色する。特にアルツハイマー病の老人班や、神経原線維変化を検索する。
切片の厚みはA（8～12μm）
が望ましい。
Bを用いた銀反応液を使用する（C不使用の銀反応液）。
プロテイン銀液中に、触媒樹状突起として銅片を沈める。
還元液には、ハイドロキノン・硫酸ナトリウムを使用。
神経原線維
酸化剤を必要としない。
厚め, プロテイン銀, 硝酸銀