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  • 1

    세포배양 준비물

    -준비물 1) petri dish : 양전하가 코팅되어 있는 세포를 키우는 접시 2) DMEM media : 정상세포를 성장시키는 영양분 3) RPMI-1640 media : 암세포를 성장시키는 영양분 4) ampicillin : 항생제와 비슷 , 내가 키우고자 하는 세포만 키우기 위해 필요 5) FBS : 혈청같은거,세포가 잘자라게하는 영양제, 노란색을 띔 6) 0.05% Tripsin-EDTA : 데미지 없이 petri dish에서 세포를 떼어내기 위한것

  • 2

    세포배양 조건

    : CO₂ 인큐베이터에서 배양(CO₂ 농도 5% , 37‘C에서 배양)

  • 3

    세포배양 배지 조성

    1) 정상세포 배지 : DMEM(500mL) + ampicillin(1%,5mL) + FBS(10%,50mL) 2) 암세포 배지 : RPMI-1640(500mL) + ampicillin(1%,5mL) + FBS(10%,50mL)

  • 4

    기기분석 목적

    다양한 시료의 물리화학적 특성 분석 -> 물질의구조, 열적변이, 물질의물성, 물질의형태, 결정및무정형등

  • 5

    분석장비의 종류

    1) H-NMR(핵자기공명분광기) : 물질의 구조를 파악 2) FT-IR(적외선 분광기) : 물질의 구조를 파악 3) GPC : 물질의 분자량 측정 4) UV-vis : 자외선을 조사 , 농도를 측정 , 많은양으로 분석 5) HPLC : 용매를 액체로 이용해 정량 및 정성 분석 , 적은양으로 분석 6) GC : HPLC와 달리 용매를 기체로 이용해 정량 및 정성 분석 7) TGA : 열분해 온도 측정 8) DSC : 열흐름 측정, 결정화온도(Tc), 녹는점(Tm), 유리전이 온도(Tg) 분석

  • 6

    HPLC목적

    다양한 물질을 성분별로 분리해서 함유량 즉 정량 및 정성분석하는것

  • 7

    컬럼

    1) 메뉴얼 컬럼 : 63~200um 크기의 불균일한 입자를 갖는 레진으로 구성, 분리도 ↓ 2) HPLE 컬럼 : 3~5um 크기의 균일한 입자를 갖는 레진으로 구성, 분리도 ↑ 레진의 입자크기가 작을 수록 물질 분리효율 증가, 컬럼 내부 압력 증가 -> HPLC는 액체의 이동상을 이용해 물질의 높은 분리를 수행

  • 8

    컬럼의 특성

    1) 마이크로 입자크기의 다공성으로 이루어진 실리카 레진으로 구성 2) 컬럼 길이 길수록 분리 분석 시간 ↑, 물질분리 효율 ↑ 3) 컬럼 길이 짧을수록 분리 분석 시간 ↓, 물질분리 효율 ↓ 4) 컬럼 직경 클수록 한번에 주입 하는 시료의 양 증가 4) 컬럼 직경 작을수록 높은 민감도

  • 9

    세포 독성 테스트 실험

    -혈구계수기 : media 1mL안에 들어 있는 세포 수 기준 (A+B+C+D) x 희석배수 x 10⁴ = 1mL 안에 들어 있는 세포의 수 4 -독성 테스트 실험 1) 96-well plate에 1well당 5000개의 세포 배양 2) 24시간 동안 CO₂인큐베이터에서 배양 3) 의약품,의약품 제조시 사용된 시료를 96-well plate에 처리 4) 24~48시간 동안 CO₂ 인큐베이터에서 배양 5) MTT, XTT 시약으로 각각 540nm , 450nm에서 흡광도 측정

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    세포배양 준비물

    -준비물 1) petri dish : 양전하가 코팅되어 있는 세포를 키우는 접시 2) DMEM media : 정상세포를 성장시키는 영양분 3) RPMI-1640 media : 암세포를 성장시키는 영양분 4) ampicillin : 항생제와 비슷 , 내가 키우고자 하는 세포만 키우기 위해 필요 5) FBS : 혈청같은거,세포가 잘자라게하는 영양제, 노란색을 띔 6) 0.05% Tripsin-EDTA : 데미지 없이 petri dish에서 세포를 떼어내기 위한것

  • 2

    세포배양 조건

    : CO₂ 인큐베이터에서 배양(CO₂ 농도 5% , 37‘C에서 배양)

  • 3

    세포배양 배지 조성

    1) 정상세포 배지 : DMEM(500mL) + ampicillin(1%,5mL) + FBS(10%,50mL) 2) 암세포 배지 : RPMI-1640(500mL) + ampicillin(1%,5mL) + FBS(10%,50mL)

  • 4

    기기분석 목적

    다양한 시료의 물리화학적 특성 분석 -> 물질의구조, 열적변이, 물질의물성, 물질의형태, 결정및무정형등

  • 5

    분석장비의 종류

    1) H-NMR(핵자기공명분광기) : 물질의 구조를 파악 2) FT-IR(적외선 분광기) : 물질의 구조를 파악 3) GPC : 물질의 분자량 측정 4) UV-vis : 자외선을 조사 , 농도를 측정 , 많은양으로 분석 5) HPLC : 용매를 액체로 이용해 정량 및 정성 분석 , 적은양으로 분석 6) GC : HPLC와 달리 용매를 기체로 이용해 정량 및 정성 분석 7) TGA : 열분해 온도 측정 8) DSC : 열흐름 측정, 결정화온도(Tc), 녹는점(Tm), 유리전이 온도(Tg) 분석

  • 6

    HPLC목적

    다양한 물질을 성분별로 분리해서 함유량 즉 정량 및 정성분석하는것

  • 7

    컬럼

    1) 메뉴얼 컬럼 : 63~200um 크기의 불균일한 입자를 갖는 레진으로 구성, 분리도 ↓ 2) HPLE 컬럼 : 3~5um 크기의 균일한 입자를 갖는 레진으로 구성, 분리도 ↑ 레진의 입자크기가 작을 수록 물질 분리효율 증가, 컬럼 내부 압력 증가 -> HPLC는 액체의 이동상을 이용해 물질의 높은 분리를 수행

  • 8

    컬럼의 특성

    1) 마이크로 입자크기의 다공성으로 이루어진 실리카 레진으로 구성 2) 컬럼 길이 길수록 분리 분석 시간 ↑, 물질분리 효율 ↑ 3) 컬럼 길이 짧을수록 분리 분석 시간 ↓, 물질분리 효율 ↓ 4) 컬럼 직경 클수록 한번에 주입 하는 시료의 양 증가 4) 컬럼 직경 작을수록 높은 민감도

  • 9

    세포 독성 테스트 실험

    -혈구계수기 : media 1mL안에 들어 있는 세포 수 기준 (A+B+C+D) x 희석배수 x 10⁴ = 1mL 안에 들어 있는 세포의 수 4 -독성 테스트 실험 1) 96-well plate에 1well당 5000개의 세포 배양 2) 24시간 동안 CO₂인큐베이터에서 배양 3) 의약품,의약품 제조시 사용된 시료를 96-well plate에 처리 4) 24~48시간 동안 CO₂ 인큐베이터에서 배양 5) MTT, XTT 시약으로 각각 540nm , 450nm에서 흡광도 측정