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遺伝子工学基礎　4

遺伝子工学基礎　4
33問 • 1年前
  • 橋本健太郎
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    問題一覧

  • 1

    遺伝子工学では、目的の遺伝子を解析したり発現するためにまず①に②する。

    プラスミドベクター, クローニング

  • 2

    プラスミドにDNA断片を組み込むことを何というか？

    クローニング

  • 3

    DNAのクローニングには、DNAの切断と結合（①）が必須の基本技術になる

    ライゲーション

  • 4

    二本鎖DNAの内部を切断する制限酵素は何か

    エンドヌクレアーゼ

  • 5

    多くの場合、切断配列は回文構造（①）である

    パリンドローム

  • 6

    DNA配列のパリンドロームとは ①と②が同一なDNA配列が回文配列である

    相補鎖, 配列

  • 7

    多くの制限酵素はパリンドロームを認識し、①（②）を形成して働く

    二量体, ホモダイマー

  • 8

    DNAクローニングに最もよく使われるのは①塩基

    6

  • 9

    6塩基を認識する制限酵素が多い理由は ①であるため 平均②（③）bpに一回切断するため、遺伝子内部が切られる可能性が低い

    種類が豊富, 4096, 4の6乗

  • 10

    ホーミングエンドヌクレアーゼは①bp以上の長い認識配列を持ち、②と呼ばれる

    20, メガヌクレアーゼ

  • 11

    ホーミングエンドヌクレアーゼはバクテリアの制限酵素である。◯❌

    ❌

  • 12

    切断末端は、突出の形状に基づいて三種類

    5‘突出型, 3‘突出型, 平滑末端

  • 13

    制限酵素切断後の末端形状のリン酸基はどこについているか？

    5‘末端

  • 14

    平滑末端を英語で

    ブラストエンド

  • 15

    最も有名な制限酵素であるEcoRIの認識配列は？

    GAATTC

  • 16

    制限酵素の認識配列は、バッファー条件により特異性が下がることがある。非特異的切断活性のことを何というか？

    スター活性

  • 17

    制限酵素のスター活性の実験では何に気をつけなければならないか

    グリセロールの濃度

  • 18

    制限酵素は何を切断しているか？

    ホスホジエステル結合

  • 19

    二重鎖DNA間でホスホジエステル結合を形成する酵素は何か？

    DNAリガーゼ

  • 20

    DNAの結合には、DNAの①に②が存在することが必要

    5’末端, リン酸基

  • 21

    DNAリガーゼはすべての生物に普遍的に存在する酵素であり、実験では①が一般的に用いられる

    T4DNAリガーゼ

  • 22

    クローニングされるインサートDNAの向きについて 酵素が一種類の場合、順方向にも逆方向にもクローニングをされる。よって、インサートDNA挿入方向はどうなるか？

    ランダム

  • 23

    酵素が２種類の場合、インサートDNAが必ず特定の向きにクローニング。このクローニング方法を何というか？

    ディレクショナルクローニングされる

  • 24

    制限酵素が一種類の場合の問題 一種類の制限酵素で切断したプラスミドベクターは、ligamentsを入れると①により再環状化する。 これを防ぐために、切断されたベクターの末端のリン酸基を②により除去する。

    セルフライゲーション, フォスファターゼ

  • 25

    プラスミドベクターには多数の制限酵素配列をまとめた①があり、ここにDNA断片を挿入する。制限酵素で切断される箇所のことを②という。

    マルチクローニングサイト, 制限酵素サイト

  • 26

    多数の制限酵素サイトがあるとなぜ便利か？

    複数のDNA断片を、順次ベクターにクローニングすることができる。

  • 27

    クローニングしたプラスミドDNAは大腸菌に①する。

    トランスフォーム

  • 28

    クローニングの確認は、①と②により確認できる

    制限酵素処理, アガロースゲル電気泳動

  • 29

    平滑末端ライゲーションの問題点。二つ

    効率が低い, インサートの方向が一定でない

  • 30

    どうやってPCR産物をクローニングするか？ プライマーの①に②を追加することで、PCR産物の末端に②が付加される。そして、PCR産物を制限酵素処理し、ベクターへクローニングする。

    5‘末端, 制限酵素サイト

  • 31

    同じ配列を切断する制限酵素のことを何というか？ また、制限酵素の例を一つ挙げよ

    アイソシジマー, Smal Xmal

  • 32

    同じ配列を切断するが、異なる形状を生じるものを何というか？

    ネオシゾマー

  • 33

    相同な短い配列を持つ二つのDNA末端を制限酵素を使わずに連結する方法は何か？

    Gibson assembly法

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    プラスミドベクター, クローニング

  • 2

    プラスミドにDNA断片を組み込むことを何というか？

    クローニング

  • 3

    DNAのクローニングには、DNAの切断と結合（①）が必須の基本技術になる

    ライゲーション

  • 4

    二本鎖DNAの内部を切断する制限酵素は何か

    エンドヌクレアーゼ

  • 5

    多くの場合、切断配列は回文構造（①）である

    パリンドローム

  • 6

    DNA配列のパリンドロームとは ①と②が同一なDNA配列が回文配列である

    相補鎖, 配列

  • 7

    多くの制限酵素はパリンドロームを認識し、①（②）を形成して働く

    二量体, ホモダイマー

  • 8

    DNAクローニングに最もよく使われるのは①塩基

    6

  • 9

    6塩基を認識する制限酵素が多い理由は ①であるため 平均②（③）bpに一回切断するため、遺伝子内部が切られる可能性が低い

    種類が豊富, 4096, 4の6乗

  • 10

    ホーミングエンドヌクレアーゼは①bp以上の長い認識配列を持ち、②と呼ばれる

    20, メガヌクレアーゼ

  • 11

    ホーミングエンドヌクレアーゼはバクテリアの制限酵素である。◯❌

    ❌

  • 12

    切断末端は、突出の形状に基づいて三種類

    5‘突出型, 3‘突出型, 平滑末端

  • 13

    制限酵素切断後の末端形状のリン酸基はどこについているか？

    5‘末端

  • 14

    平滑末端を英語で

    ブラストエンド

  • 15

    最も有名な制限酵素であるEcoRIの認識配列は？

    GAATTC

  • 16

    制限酵素の認識配列は、バッファー条件により特異性が下がることがある。非特異的切断活性のことを何というか？

    スター活性

  • 17

    制限酵素のスター活性の実験では何に気をつけなければならないか

    グリセロールの濃度

  • 18

    制限酵素は何を切断しているか？

    ホスホジエステル結合

  • 19

    二重鎖DNA間でホスホジエステル結合を形成する酵素は何か？

    DNAリガーゼ

  • 20

    DNAの結合には、DNAの①に②が存在することが必要

    5’末端, リン酸基

  • 21

    DNAリガーゼはすべての生物に普遍的に存在する酵素であり、実験では①が一般的に用いられる

    T4DNAリガーゼ

  • 22

    クローニングされるインサートDNAの向きについて 酵素が一種類の場合、順方向にも逆方向にもクローニングをされる。よって、インサートDNA挿入方向はどうなるか？

    ランダム

  • 23

    酵素が２種類の場合、インサートDNAが必ず特定の向きにクローニング。このクローニング方法を何というか？

    ディレクショナルクローニングされる

  • 24

    制限酵素が一種類の場合の問題 一種類の制限酵素で切断したプラスミドベクターは、ligamentsを入れると①により再環状化する。 これを防ぐために、切断されたベクターの末端のリン酸基を②により除去する。

    セルフライゲーション, フォスファターゼ

  • 25

    プラスミドベクターには多数の制限酵素配列をまとめた①があり、ここにDNA断片を挿入する。制限酵素で切断される箇所のことを②という。

    マルチクローニングサイト, 制限酵素サイト

  • 26

    多数の制限酵素サイトがあるとなぜ便利か？

    複数のDNA断片を、順次ベクターにクローニングすることができる。

  • 27

    クローニングしたプラスミドDNAは大腸菌に①する。

    トランスフォーム

  • 28

    クローニングの確認は、①と②により確認できる

    制限酵素処理, アガロースゲル電気泳動

  • 29

    平滑末端ライゲーションの問題点。二つ

    効率が低い, インサートの方向が一定でない

  • 30

    どうやってPCR産物をクローニングするか？ プライマーの①に②を追加することで、PCR産物の末端に②が付加される。そして、PCR産物を制限酵素処理し、ベクターへクローニングする。

    5‘末端, 制限酵素サイト

  • 31

    同じ配列を切断する制限酵素のことを何というか？ また、制限酵素の例を一つ挙げよ

    アイソシジマー, Smal Xmal

  • 32

    同じ配列を切断するが、異なる形状を生じるものを何というか？

    ネオシゾマー

  • 33

    相同な短い配列を持つ二つのDNA末端を制限酵素を使わずに連結する方法は何か？

    Gibson assembly法