遺伝性(家族性)のがんは①遺伝子の変異によるものがほとんど
機能②が原因だが、遺伝様式は③
①がん抑制, ②喪失, ③常染色体顕性
がん抑制遺伝子の異常による遺伝性のがんは、がん抑制遺伝子の両アリル性の①が原因であるが、見かけ上、②遺伝のように振舞う
①機能欠損, ②顕性
変異や欠失によるDNAの直接的な変化だけでなく、①による不活性化によってもがん抑制遺伝子の機能欠損が生じ得る(→②)
①DNAメチル, ②エピゲノム
単一遺伝子疾患は、遺伝子の効果(遺伝要因)が強く、()の法則に従う
メンデル
()病は原因遺伝子がミトコンドリアDNAにあるかゲノムDNAにあるかで遺伝様式が異なる
ミトコンドリア
遺伝性のがん(家族性腫瘍)は①遺伝子が一つ異常で生まれ、生後もう一つ変異して発症する(②性遺伝)
①がん抑制, ②顕
3塩基を単位としたマイクロサテライトの異常伸長が原因となる疾患を何と呼ぶか?
トリプレットリピート病
細菌や酵母の細胞質に存在し、ゲノムDNAと独立して増殖し、娘細胞に引き継がれるDNAは?
プラスミド
プラスミド
3000塩基対程度~1万塩基対以上の()DNA
環状2本鎖
アガロースゲルによるDNAの分離
()により、DNAをサイズごとにバンドとして分離できる
電気泳動
()によってATP依存的にDNAを連結できる
DNAリガーゼ
遺伝子の保持や発現に用いられるDNA・RNAは?
ベクター
()断片とインサート断片をDNAリガーゼで連結し、新たな環状DNAを作製する
ベクター
大腸菌
()状ゲノムDNA(460万塩基対)を持つ
環
大腸菌
外来の環状DNAである()を保有することがある
プラスミド
プラスミドの増幅
組換えプラスミドDNAを大腸菌に導入することをなんという?
形質転換
プラスミドの構造
制限酵素サイトが集積するのは?
マルチクローニングサイト
プラスミドの構造
プラスミドの複製に必要なのは?
複製起点
DNAの検出法(特定のDNA配列の有無・サイズ)
サザンブロット法
RNAの検出法(RNAの発現量・サイズ)
ノーザンブロット法
細胞内の核酸の検出法
in situ ハイブリダイゼーション法
PCRによるDNA増幅
①菌由来の②を利用することにより簡便化
①好熱, ②耐熱性DNAポリメラーゼ
PCRによるDNA増幅
反応が進むことにより、2本の()に挟まれた領域の断片がほとんどのDNA産物を占める
プライマー
PCRによるDNA増幅
()は通常20-30塩基程度のDNA配列であり、人工合成したものである
プライマー
ゲノムDNAやcDNAの断片をプラスミドに導入することができる多種の配列が混在したものは?
ライブラリー
ライブラリーの中から必要な配列を持つクローンを単離することを何という?
クローニング
cDNAは①を鋳型に、②酵素を用いて作製される
①mRNA, ②逆転写
()法によってDNAを増幅することができる
PCR
遺伝子組換え技術は()開発の基盤技術である
バイオ医薬品
DNA配列決定をシークエンスと言うが、現在は()の利用が一般的である
ジデオキシ法
遺伝子変異の導入は変異を含む()を用いてPCRを行う
プライマー
バイオ医薬品の製造法
()や()の中で合成する
微生物, 細胞
抗原に特異的に結合し、免疫応答を誘導するタンパク質は?
抗体
分子生物学における一般的方法論
分子レベルの解析
変化3つ
発現量, 局在, 相互作用
発現量の変化の検出(タンパク質)で最も重要な方法は?
ウエスタンブロット
ウエスタンブロットの見方
最も興味のあるタンパク質だけでなく、少なくとももう一つ、別のタンパク質の染色を示すことが多い
→()とも呼ぶ
loading control
ウエスタンブロットの見方
()遺伝子がよく使われる
ハウスキーピング
ウエスタンブロットの見方
特定の細胞画分や細胞種に存在するタンパク質()も利用される
マーカータンパク質
ウエスタンブロットの注意点
全く別のタンパク質が非特異的に認識されることがあることを何と言うか?
交差反応
ウエスタンブロットは()の良し悪しが結果の信頼性を左右する
抗体
免疫染色法
標識した()抗体を用いることによって、抗原の細胞内局在や組織分布を可視化することができる
二次
蛍光タンパク質との融合
()などで固定した細胞でもGFPの蛍光は保持される
ホルマリン
ある生物や細胞の持つタンパク質の全セットを何という?
プロテオーム
実験動物としてのマウス
近親交配を20世代以上重ねた①系が多数樹立されている
→②がそろっている
①近交, ②遺伝的背景
遺伝子置換をし、変異遺伝子だけが働くマウス
ノックインマウス
遺伝子ノックアウトをして、活性を持つ遺伝子が存在しないマウスは?
ノックアウトマウス
遺伝子付加し、どちらの遺伝子も働くマウスは?
トランスジェニックマウス
トランスジェニックマウスは()の配列により発現部位をコントロールできる
プロモーター
ES細胞はマウスやヒトの初期胚()の内部細胞塊に由来
胚盤胞
相同組換えによる挿入では()は発現しない
ジフテリア毒素
ノックアウトマウス作製法
相同組換えによって遺伝子を破壊した①を用いて②マウスを作製し、生まれた③マウス同士を交配して遺伝子が2つとも破壊されたノックアウトマウスを得る
①ES細胞, ②キメラ, ③ヘテロ
発展的なモデルマウスを()マウスという
コンディショナル
発生に必要な遺伝子の場合、全身で遺伝子をノックアウトすると、()性致死となり、マウスが生まれてこない、あるいは生後長く生きられないなどの問題が生じる
胚
ノックアウトマウスは()の影響を調べられる
機能喪失
トランスジェニックマウスは()の影響を調べられる
機能獲得
RT-PCRとはRNAから()を合成し、それを鋳型にPCRを行う
cDNA
新型コロナのPCR検査は?
リアルタイムRT-PCR
RNAの局在を調べる方法
in situハイブリダイゼーション
in situハイブリダイゼーション
抗体ではなく、標識した()をプローブとして用いることでRNAを検出する
核酸
ある特定の配列を持ったDNAやRNAの局在を組織切片や細胞内において蛍光分子を用いて可視化する方法は何か
蛍光in situハイブリダイゼーション
蛍光in situハイブリダイゼーションの略は?
FISH
既知の性状・機能情報に基づいて、変動遺伝子群に多く見られる性質・共通性を調べるのは()解析
遺伝子オントロジー
多数のDNA断片の配列を並列に一挙に解読することで、大量の配 列情報を取得することができるのは?
次世代シークエンス
RNA-seqではイントロンをまたいだリードが得られる←どこで()が起こったかを反映する
スプライシング
RNA-seq
新規の転写産物や()を検出することができる
アイソフォーム
細胞や組織に発現するRNA(mRNA)の全体像のこと
トランスクリプトーム
生体分子等の全体像に注目する研究分野を()と呼ぶ
オミックス
()と呼ばれる21塩基程度の2本鎖RNAがダイサーと呼ばれるRNA分解酵素によって生成され、これがRISCという複合体にとりこまれる
siRNA
マイクロRNAは()と呼ばれる分泌小胞内にも存在し、細胞間コミュニケーションに関わる可能性がある
エクソソーム
デュシェンヌ型筋ジストロフィーは巨大遺伝子()の欠損によって発症
ジストロフィン
巨大遺伝子ジストロフィンの欠損によって発症するのは?
デュシェンヌ型筋ジストロフィー
脊髄の運動ニューロンが障害されることで筋萎縮が生じる常染色体劣性(潜性)遺伝の疾患
脊髄性筋萎縮症
脊髄性筋萎縮症は5番染色体長腕に存在する()遺伝子の機能喪失変異が原因
SMN1
細胞培養液(培地とも言う)には、無機塩類(塩化カルシウム、硫酸マグネシウム、塩化ナトリウム、炭酸水素ナトリウムなど)、アミノ酸、ビタミン、グルコース、ピルビン酸などが含まれる。さらに、ウシやウマなどの()を加えることが多い。
血清
細胞の培養は通常、CO2インキュベーター内で培養するが、CO2は何%か
5%
目的の遺伝子の機能を増加させてその変化をみる方法
→遺伝子の①
→②による強制発現
①過剰発現, ②遺伝子導入
遺伝性(家族性)のがんは①遺伝子の変異によるものがほとんど
機能②が原因だが、遺伝様式は③
①がん抑制, ②喪失, ③常染色体顕性
がん抑制遺伝子の異常による遺伝性のがんは、がん抑制遺伝子の両アリル性の①が原因であるが、見かけ上、②遺伝のように振舞う
①機能欠損, ②顕性
変異や欠失によるDNAの直接的な変化だけでなく、①による不活性化によってもがん抑制遺伝子の機能欠損が生じ得る(→②)
①DNAメチル, ②エピゲノム
単一遺伝子疾患は、遺伝子の効果(遺伝要因)が強く、()の法則に従う
メンデル
()病は原因遺伝子がミトコンドリアDNAにあるかゲノムDNAにあるかで遺伝様式が異なる
ミトコンドリア
遺伝性のがん(家族性腫瘍)は①遺伝子が一つ異常で生まれ、生後もう一つ変異して発症する(②性遺伝)
①がん抑制, ②顕
3塩基を単位としたマイクロサテライトの異常伸長が原因となる疾患を何と呼ぶか?
トリプレットリピート病
細菌や酵母の細胞質に存在し、ゲノムDNAと独立して増殖し、娘細胞に引き継がれるDNAは?
プラスミド
プラスミド
3000塩基対程度~1万塩基対以上の()DNA
環状2本鎖
アガロースゲルによるDNAの分離
()により、DNAをサイズごとにバンドとして分離できる
電気泳動
()によってATP依存的にDNAを連結できる
DNAリガーゼ
遺伝子の保持や発現に用いられるDNA・RNAは?
ベクター
()断片とインサート断片をDNAリガーゼで連結し、新たな環状DNAを作製する
ベクター
大腸菌
()状ゲノムDNA(460万塩基対)を持つ
環
大腸菌
外来の環状DNAである()を保有することがある
プラスミド
プラスミドの増幅
組換えプラスミドDNAを大腸菌に導入することをなんという?
形質転換
プラスミドの構造
制限酵素サイトが集積するのは?
マルチクローニングサイト
プラスミドの構造
プラスミドの複製に必要なのは?
複製起点
DNAの検出法(特定のDNA配列の有無・サイズ)
サザンブロット法
RNAの検出法(RNAの発現量・サイズ)
ノーザンブロット法
細胞内の核酸の検出法
in situ ハイブリダイゼーション法
PCRによるDNA増幅
①菌由来の②を利用することにより簡便化
①好熱, ②耐熱性DNAポリメラーゼ
PCRによるDNA増幅
反応が進むことにより、2本の()に挟まれた領域の断片がほとんどのDNA産物を占める
プライマー
PCRによるDNA増幅
()は通常20-30塩基程度のDNA配列であり、人工合成したものである
プライマー
ゲノムDNAやcDNAの断片をプラスミドに導入することができる多種の配列が混在したものは?
ライブラリー
ライブラリーの中から必要な配列を持つクローンを単離することを何という?
クローニング
cDNAは①を鋳型に、②酵素を用いて作製される
①mRNA, ②逆転写
()法によってDNAを増幅することができる
PCR
遺伝子組換え技術は()開発の基盤技術である
バイオ医薬品
DNA配列決定をシークエンスと言うが、現在は()の利用が一般的である
ジデオキシ法
遺伝子変異の導入は変異を含む()を用いてPCRを行う
プライマー
バイオ医薬品の製造法
()や()の中で合成する
微生物, 細胞
抗原に特異的に結合し、免疫応答を誘導するタンパク質は?
抗体
分子生物学における一般的方法論
分子レベルの解析
変化3つ
発現量, 局在, 相互作用
発現量の変化の検出(タンパク質)で最も重要な方法は?
ウエスタンブロット
ウエスタンブロットの見方
最も興味のあるタンパク質だけでなく、少なくとももう一つ、別のタンパク質の染色を示すことが多い
→()とも呼ぶ
loading control
ウエスタンブロットの見方
()遺伝子がよく使われる
ハウスキーピング
ウエスタンブロットの見方
特定の細胞画分や細胞種に存在するタンパク質()も利用される
マーカータンパク質
ウエスタンブロットの注意点
全く別のタンパク質が非特異的に認識されることがあることを何と言うか?
交差反応
ウエスタンブロットは()の良し悪しが結果の信頼性を左右する
抗体
免疫染色法
標識した()抗体を用いることによって、抗原の細胞内局在や組織分布を可視化することができる
二次
蛍光タンパク質との融合
()などで固定した細胞でもGFPの蛍光は保持される
ホルマリン
ある生物や細胞の持つタンパク質の全セットを何という?
プロテオーム
実験動物としてのマウス
近親交配を20世代以上重ねた①系が多数樹立されている
→②がそろっている
①近交, ②遺伝的背景
遺伝子置換をし、変異遺伝子だけが働くマウス
ノックインマウス
遺伝子ノックアウトをして、活性を持つ遺伝子が存在しないマウスは?
ノックアウトマウス
遺伝子付加し、どちらの遺伝子も働くマウスは?
トランスジェニックマウス
トランスジェニックマウスは()の配列により発現部位をコントロールできる
プロモーター
ES細胞はマウスやヒトの初期胚()の内部細胞塊に由来
胚盤胞
相同組換えによる挿入では()は発現しない
ジフテリア毒素
ノックアウトマウス作製法
相同組換えによって遺伝子を破壊した①を用いて②マウスを作製し、生まれた③マウス同士を交配して遺伝子が2つとも破壊されたノックアウトマウスを得る
①ES細胞, ②キメラ, ③ヘテロ
発展的なモデルマウスを()マウスという
コンディショナル
発生に必要な遺伝子の場合、全身で遺伝子をノックアウトすると、()性致死となり、マウスが生まれてこない、あるいは生後長く生きられないなどの問題が生じる
胚
ノックアウトマウスは()の影響を調べられる
機能喪失
トランスジェニックマウスは()の影響を調べられる
機能獲得
RT-PCRとはRNAから()を合成し、それを鋳型にPCRを行う
cDNA
新型コロナのPCR検査は?
リアルタイムRT-PCR
RNAの局在を調べる方法
in situハイブリダイゼーション
in situハイブリダイゼーション
抗体ではなく、標識した()をプローブとして用いることでRNAを検出する
核酸
ある特定の配列を持ったDNAやRNAの局在を組織切片や細胞内において蛍光分子を用いて可視化する方法は何か
蛍光in situハイブリダイゼーション
蛍光in situハイブリダイゼーションの略は?
FISH
既知の性状・機能情報に基づいて、変動遺伝子群に多く見られる性質・共通性を調べるのは()解析
遺伝子オントロジー
多数のDNA断片の配列を並列に一挙に解読することで、大量の配 列情報を取得することができるのは?
次世代シークエンス
RNA-seqではイントロンをまたいだリードが得られる←どこで()が起こったかを反映する
スプライシング
RNA-seq
新規の転写産物や()を検出することができる
アイソフォーム
細胞や組織に発現するRNA(mRNA)の全体像のこと
トランスクリプトーム
生体分子等の全体像に注目する研究分野を()と呼ぶ
オミックス
()と呼ばれる21塩基程度の2本鎖RNAがダイサーと呼ばれるRNA分解酵素によって生成され、これがRISCという複合体にとりこまれる
siRNA
マイクロRNAは()と呼ばれる分泌小胞内にも存在し、細胞間コミュニケーションに関わる可能性がある
エクソソーム
デュシェンヌ型筋ジストロフィーは巨大遺伝子()の欠損によって発症
ジストロフィン
巨大遺伝子ジストロフィンの欠損によって発症するのは?
デュシェンヌ型筋ジストロフィー
脊髄の運動ニューロンが障害されることで筋萎縮が生じる常染色体劣性(潜性)遺伝の疾患
脊髄性筋萎縮症
脊髄性筋萎縮症は5番染色体長腕に存在する()遺伝子の機能喪失変異が原因
SMN1
細胞培養液(培地とも言う)には、無機塩類(塩化カルシウム、硫酸マグネシウム、塩化ナトリウム、炭酸水素ナトリウムなど)、アミノ酸、ビタミン、グルコース、ピルビン酸などが含まれる。さらに、ウシやウマなどの()を加えることが多い。
血清
細胞の培養は通常、CO2インキュベーター内で培養するが、CO2は何%か
5%
目的の遺伝子の機能を増加させてその変化をみる方法
→遺伝子の①
→②による強制発現
①過剰発現, ②遺伝子導入